宿主細胞蛋白（HCPs）是生物制品生產過程中產生的關鍵工藝相關雜質之一，可導致患者不良的免疫反應、超敏反應，另外也存在導致產品蛋白的降解等問題，影響產品的安全性和有效性，是一項關鍵質控指標。HCPs殘留檢測應用常用的方法是ELISA法，操作簡單、靈敏度高，通量較高，是HCPs殘留檢測的日常放行檢方法，各國藥典規定了用酶聯免疫法進行HCPs殘留檢測。然而，ELISA 方法檢測HCP殘留仍面臨諸多挑戰。在實際的工藝生產過程中，宿主來源、生產工藝、純化方式、生產規模等因素均可能對HCPs的種類及復雜性產生影響。

目前通過Vero細胞培養的病毒有狂犬病病毒、脊髓灰質炎病毒等，種類繁多，工藝也各有千秋。湖州申科生物Vero細胞裂解型HCP殘留檢測試劑盒（一步酶聯免疫吸附法）針對工藝過程中Vero細胞裂解后產生的大量不同種類的HCPs，可定量檢測使用Vero細胞系生產并通過細胞裂解工藝收獲的生物制品中宿主細胞蛋白的殘留檢測，抗體與校準品可覆蓋近3000種蛋白。試劑盒操作簡便，提高實驗人員的時間利用率。試劑盒抗體覆蓋率為65.1%-85.1%（IMBS-2D）和76.9%(IMBS-MS，Unique Peptide≥2）。試劑盒嚴格遵循ISO13485質量體系進行生產，并按照法規要求進行了性能驗證，各項性能滿足Vero宿主細胞蛋白檢測需求。

宿主細胞蛋白（HCP）ELISA定制化開發平臺需要具備完善的開發體系，可靠的技術平臺，專業的開發團隊，以實現長期穩定供應符合法規要求的試劑盒。其中校準品作為關鍵原材料，其良好的穩定性和溯源保障對生命周期至關重要。為確保校準品的穩定，一般采用凍干工藝制備校準品，用單因素方差分析方法對校準品進行均一性評估，采用法規規定的蛋白定量方法進行校準品的賦值，并溯源至國家標準品（如有）或BSA國家標準品。其次，由于HCPs是復雜的多分析物，為制備盡可能高覆蓋率的抗體，覆蓋工藝下特有的高風險HCPs，需采用可靠的免疫策略。得到符合性能要求的抗體后，需采用經過驗證的可靠的2D或LC-MS方法進行抗體覆蓋率的表征，以確?？贵w可以充分覆蓋各實際工藝下產生的HCPs。得到了具有代表性的抗原和性能優良的抗體后，便是ELISA檢測體系的開發，主要包括原輔料的篩選和制備研究、各組分工藝及反應體系研究、穩定性研究等。在檢測體系開發完成后，需要根據ICH及藥典要求進行分析方法驗證的評估，以確保整個檢測體系的線性、范圍、檢測限、定量限、準確度、精密度、專屬性以及耐用性等可以滿足法規要求。

湖州申科生物依托高分辨質譜技術推出宿主細胞蛋白定制化檢測服務組合，覆蓋生物制品殘留蛋白分析需求。該平臺提供四類服務：HCP蛋白檢測定制化服務；通過ELISA、雙向電泳（2D）及LC-MS/MS技術，支持常規生物制品檢測、高危及工藝相關蛋白數據庫構建以及特殊生物制品分析；抗體覆蓋率服務采用自主研發的IMBS技術結合質譜，準確評估ELISA試劑盒對工程細胞HCP的捕獲能力，并完成校準品表征；靶向HCP檢測專注于高風險殘留蛋白的方法開發；同時提供蛋白種屬鑒定服務，利用LC-MS技術溯源樣品中的物種特異性肽段。該服務體系通過多技術聯用與深度定制化策略，滿足從基礎篩查到工藝關鍵雜質監控的全維度需求。

湖州申科生物致力于提供符合嚴格法規要求的宿主細胞蛋白（HCP）ELISA檢測試劑盒。為確保產品滿足生物制品（如抗體藥、疫苗）申報（如IND/BLA）的監管標準，申科構建了全流程依規開發的質量體系：整個開發過程嚴格遵循ISO 13485質量標準，并滿足用戶審計要求。其開發流程明確包含三個關鍵階段：①HCP殘留定量檢測參考品開發：關鍵在于建立可靠的HCP抗原參考品，涵蓋抗原的表征、量值溯源與賦值、均一性和穩定性考察等，確保檢測的準確性與代表性。②高質量大批量抗體制備：通過優化的HCP抗原動物免疫策略，結合嚴謹的抗體質量標準（如建立標準、覆蓋率驗證）和穩定的制備工藝，生產具有高特異性和廣覆蓋度的檢測抗體，保證檢測的特異性和靈敏度。③檢測體系開發及驗證：進行嚴謹的檢測體系開發與驗證工作，其驗證方案符合ICH指導原則及藥典關于分析方法驗證的標準要求。同時，嚴格執行物料質控，并在潔凈車間環境中進行生產，確保試劑盒方法的穩健性、重現性與法規符合性。這一從抗原源頭到成品體系的標準化、合規化開發流程，是湖州申科HCP檢測產品品質與可靠性的根本保障。

按照美國藥典1132章節的要求，HCPs校準品需滿足代表性要求，即能覆蓋實際工藝產品生產中的HCPs。從HCP免疫檢測方法使用目的和預期風險管理要求考慮，滿足工藝開發和驗證，同時為了應對下游工藝中潛在的異常工藝失效，或工藝變更需求，建議采用上游發酵工藝末端，如澄清處理后工藝點的樣本作為HCPs的來源。在實際制備中，可采用空細胞或空載細胞在模擬實際工藝的預定條件進行采集，通過二維電泳或高分辨率質譜等蛋白質組學方法進行模擬工藝和實際工藝下HCPs的代表性表征分析。越靠近下游HCPs蛋白種類越少，也越接近DS中HCPs，但是其可能無法滿足工藝開發和驗證需求，也無法保證工藝的潛在風險，往往不推薦使用，或只作為上游工藝HCPs免疫檢測法的輔助使用。