dGTPSolution(脫氧鳥苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演著重要角色,主要應(yīng)用包括但不限于以下幾個(gè)方面:1.**DNA合成**:dGTP作為DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA鏈,特別是在PCR擴(kuò)增和cDNA合成中。2.**PCR擴(kuò)增**:在常規(guī)PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,以確保目標(biāo)DNA片段的準(zhǔn)確復(fù)制。3.**cDNA合成**:在從mRNA模板合成cDNA的過程中,dGTP是合成互補(bǔ)DNA鏈的關(guān)鍵成分。4.**DNA測(cè)序**:dGTP也用于Sanger測(cè)序等DNA測(cè)序技術(shù)中,幫助合成測(cè)序反應(yīng)中的DNA鏈。5.**質(zhì)粒構(gòu)建**:在質(zhì)粒或其他載體的構(gòu)建過程中,dGTP可能用于填補(bǔ)缺口或連接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反應(yīng)中,dGTP用于延伸引物,以合成完整的DNA鏈。7.**DNA標(biāo)記**:dGTP可以用于DNA片段的標(biāo)記,便于后續(xù)的克隆和檢測(cè)。dGTPSolution通常以100mM的濃度提供,以便于在實(shí)驗(yàn)中根據(jù)需要進(jìn)行稀釋。在使用時(shí),應(yīng)確保產(chǎn)品具有高純度、無DNase和RNase污染,以保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。此外,dGTPSolution應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C的條件下,避免反復(fù)凍融,以保持其穩(wěn)定性。FnCas12a不僅可用于體外dsDNA的特異剪切,也可用于靶標(biāo)核酸的快速檢測(cè),如HOLMES核酸快檢技術(shù)。DYKDDDDK Peptide
DNaseI是一種使用的酶,它能夠水解單鏈或雙鏈DNA,產(chǎn)生5'端為磷酸基團(tuán)的二核苷酸、三核苷酸或更短的寡核苷酸片段。這種酶的活性依賴于鈣離子,并且可以被鎂離子或二價(jià)錳離子啟動(dòng)。在鎂離子存在的情況下,DNaseI可以隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn);而在二價(jià)錳離子存在時(shí),它可以在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈,形成平末端或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。DNaseI的一個(gè)特點(diǎn)是它不含RNase活性,因此可以用于處理各種RNA樣品,而不會(huì)對(duì)RNA造成降解。DNaseI的應(yīng)用非常廣,包括但不限于:-制備不含DNA的RNA樣品;-在RT-PCR反應(yīng)前去除RNA樣品中可能的DNA污染;-體外RNA聚合酶催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板;-進(jìn)行DNaseI足跡實(shí)驗(yàn)研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用;-缺口平移(nicktranslation);-產(chǎn)生DNA隨機(jī)片段文庫;-在細(xì)胞凋亡TUNEL檢測(cè)中部分剪切基因組DNA作為陽性對(duì)照。DNaseI通常從牛胰腺中純化得到,其分子量約為32kDa(單體)。活性定義為在37℃、10分鐘內(nèi),能夠完全降解1μgpBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量。在實(shí)驗(yàn)中,DNaseI的活性單位通常以Kunitz單位來表示,該單位是基于特定條件下酶降解DNA的能力來定義的。FliC,Serotype a (427-441) S.paratyphi A與Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無3'端"A"突出。
PCR預(yù)混合溶液是一種為聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)實(shí)驗(yàn)預(yù)先配制好的混合試劑,它包含進(jìn)行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。這種預(yù)混合溶液的設(shè)計(jì)旨在簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,減少實(shí)驗(yàn)過程中的誤差,提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和效率。通常,PCR預(yù)混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:負(fù)責(zé)在PCR過程中合成新的DNA鏈。-**dNTPs**(脫氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**緩沖體系**:提供適宜的pH和離子環(huán)境,保證DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作為DNA聚合酶的輔助因子,影響酶的活性和PCR的特異性。-**穩(wěn)定劑**:延長(zhǎng)預(yù)混合溶液的有效期和穩(wěn)定性。-**染料**(可選):如溴酚藍(lán)或類似物質(zhì),用于在電泳時(shí)觀察DNA條帶。PCR預(yù)混合溶液的使用可以減少實(shí)驗(yàn)者在每次實(shí)驗(yàn)時(shí)手動(dòng)添加各種成分的需要,從而節(jié)省時(shí)間并降低污染的風(fēng)險(xiǎn)。此外,一些預(yù)混合溶液還可能包含其他添加劑,比如增強(qiáng)劑或保護(hù)劑,以提高PCR的效率和穩(wěn)定性。
T4UvsX重組酶的保存和純化是實(shí)驗(yàn)室工作流程中的重要環(huán)節(jié),確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對(duì)長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸有額外的好處。-建議避免反復(fù)凍融,因?yàn)檫@可能會(huì)影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達(dá)和純化的。這意味著科學(xué)家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達(dá)的質(zhì)粒載體中。-然后將這個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細(xì)胞中,使其表達(dá)T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細(xì)胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細(xì)胞裂解、離心、層析等技術(shù)。注意事項(xiàng):-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨(dú)分裝保存,以避免反復(fù)凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應(yīng)時(shí)不會(huì)切割DNA鏈,而是促進(jìn)DNA鏈的重組。-本產(chǎn)品供科研用途,不應(yīng)用于臨床診斷。應(yīng)用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),如重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測(cè)技術(shù)。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實(shí)驗(yàn)中的有效性和可靠性。與其他Cas12蛋白相比,F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個(gè)氨基酸之間。
pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應(yīng)用于CUT&Tag技術(shù)中,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點(diǎn):1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域?yàn)镻roteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,特別是與大多數(shù)哺乳動(dòng)物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結(jié)構(gòu)域?yàn)門n5轉(zhuǎn)座酶,能夠特異性識(shí)別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復(fù)的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉(zhuǎn)座復(fù)合體后隨機(jī)插入靶DNA中。4.**應(yīng)用廣**:適用于CUT&Tag技術(shù)、高通量測(cè)序建庫、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。5.**操作簡(jiǎn)便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,可以在一步反應(yīng)中實(shí)現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,從細(xì)胞到二代測(cè)序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時(shí)。6.**低細(xì)胞投入量**:CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個(gè)細(xì)胞的樣本中獲得結(jié)果,甚至可以應(yīng)用于單細(xì)胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結(jié)果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,同時(shí)獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。使用體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)合成gRNA,確保gRNA的質(zhì)量和純度,這對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要 。Recombinant Human IL-20RA Protein,hFc Tag
Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術(shù)。DYKDDDDK Peptide
AdvanceFastPCRMasterMix(2×)與高保真DNA聚合酶之間的具體聯(lián)系主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.**成分**:高保真DNA聚合酶是AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的關(guān)鍵成分之一。這種酶負(fù)責(zé)在PCR過程中合成新的DNA鏈,其保真度決定了擴(kuò)增過程的準(zhǔn)確性。2.**保真度**:AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的HieffCanace?AdvanceFastHigh-FidelityDNAPolymerase具有高保真度,這意味著在復(fù)制DNA時(shí),它能夠更準(zhǔn)確地維持原始模板DNA的序列,減少錯(cuò)誤或突變的引入。3.**酶的活性**:該產(chǎn)品中的高保真DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,這些活性有助于提高PCR擴(kuò)增的特異性和效率。4.**擴(kuò)增速度**:高保真DNA聚合酶在AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中提供了快速的擴(kuò)增速度,如5秒/kb,這有助于減少PCR擴(kuò)增過程中的非特異性擴(kuò)增。5.**適用性**:高保真DNA聚合酶使得AdvanceFastPCRMasterMix(2×)能夠適用于不同GC含量的基因擴(kuò)增,包括高GC和低GC區(qū)域,提高了PCR的適用性和成功率。
重組人TNFSF12蛋白(hFcTag)是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了hFc標(biāo)簽,便于純化和檢測(cè)。TNFSF12(TumorNecrosisFactorSuperfamilyMember12),也稱為TWEAK(TNF-likeweakinducerofapoptosis),是TNF超家族的重要成員,廣參與免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞存活、炎癥反應(yīng)和組織修復(fù)。它在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,尤其是在免疫細(xì)胞的啟動(dòng)和組織損傷后的修復(fù)過程中。TNFSF12的功能與機(jī)制TNFSF12通過其胞外區(qū)與受體TNFRSF12A(也稱為TWEAKR或Fn14)結(jié)合,啟動(dòng)下游的信號(hào)通路。TNFSF12的信號(hào)轉(zhuǎn)...