細胞凍存時間和操作步驟：1、首先我們需要凍存培養液，通常細胞凍存液含10%的DMSO，或者是甘油、10-20%的小牛血清；、取對數生長期細胞，并且還需要用PBS進行清洗，需要注意在這里要丟棄掉舊的細胞凍存液；3.去除PBS，加入適量的胰蛋白酶，以覆蓋住培養皿表面為宜，然后把單層生長的細胞消化掉；然后離心1000rpm5min時間；4、去除胰蛋白酶，加入凍存培養液，輕輕吹打使細胞的分布變得均勻，調節細胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml，需要注意這是較佳的細胞密度；5、將細胞裝入凍存管之中，每管的含量應該保持在1～1.5ml之間。在凍存管上標明細名稱、時間、操作者；6、較后要說的就是細胞凍存的時間了，對于標準的凍存程序來說，需要進行梯度降溫，降溫速率-1～-2℃/min，一旦溫度達到-25℃以下時，那么就可增至-5℃～-10℃/min；等到-100℃的時候，可迅速的放入到液氮之中。也可將凍存管放入-20℃冰箱中兩小時，然后放入-70℃冰箱中進行過夜，較后取出凍存管并移入到液氮容器內。無血清凍存液注意事項：請選擇對數生長期細胞進行凍存。廣州正規無血清細胞凍存液服務電話

無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類細菌、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。高安全性，完全使用醫藥品等級原料進行生產，不含動物成分，細菌、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產品之間有更高的產品質量一致性。2.細胞存活率高，無批次差異。3.完全凍存液配方，可直接使用，方便簡捷，可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經過費時的程序降溫過程（省時、省力、省錢）。無血清細胞，無血清干細胞及MSC凍存液儲存于4℃以下。質量保障期從產品的生產日期起，為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時，盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低，推薦將100ml產品分裝小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。濟南無血清細胞凍存液供應商無血清細胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。

以前在另一家實驗室的時候，凍存細胞根本就沒有講究這些標準操作。凍存的細胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纖維細胞）、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。將細胞酶消化后直接參與離心，加入凍存液（含90%的血清和10%的DMS0)，直接放在-80℃冰箱。兩三天后移入液氮中，較久保存，幾年后細胞的活力仍沒有什么受損，照常能復蘇，成活率高。但有三點須注意：（1）一是細胞的生長狀態要好，不能長得過稀，同樣也不能過密，細胞的狀態看起來相當健康。70%密度的要保存的細胞須再長24h才能全滿，萬一細胞狀態不好，可以酶消化后再繁殖一次；（2）凍存細胞的量要留心，不能太密也不能太稀，一般1OOmm培養皿的細胞凍存為3~4管；（3）存放在-80℃冰箱的時間不能過長，一兩天后轉移到液氮罐里。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細胞，半年還有30%~50%的細胞有活性，但一年的細胞就沒有活的。

無血清快速細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色：高安全性，完全使用醫藥品等級原料進行生產，不含動物成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產品之間有更高的產品質量一致性。細胞存活率高，無批次差異。完全凍存液配方，可直接使用，方便簡捷，可直接存放于-70℃冰箱凍存，無需經過費時的程序降溫過程（省時、省力、省錢）。無血清細胞凍存液存儲條件：推薦將產品分裝成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的優勢：簡單、方便、快捷。1.即用型，無需現配，可直接使用。2.可孔板原位凍存，可微量凍存，無需使用凍存管。3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單。4.不含血清，較大減少細胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存。無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的方法：1.驗證陽性克隆的細胞培養孔，將培養基上清小心吸取干凈；2.加入適量Cellregen無血清細胞凍存液，充分浸潤細胞（無需消化細胞）；3.蓋上蓋板，直接放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。程序降溫凍存技術要點是慢凍，標準的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃ min。徐州太原無血清細胞凍存液

反復吹吸混勻后，分裝于細胞凍存管中，每管500ul-1000ul。廣州正規無血清細胞凍存液服務電話

細胞凍存的注意事項：1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些，骨髓干細胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開始時，下降速度不能超過－10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大，要依細胞而定，初代培養細胞用DMSO較好，一般細胞可用甘油；用量以較小為好。有人認為人皮膚上皮細胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應再復蘇培養一次，然后再繼續凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍壞。5、注意自身的安全，對于來自人源性或病毒傳染的細胞株應特別小心。操作過程中，應避免引起氣溶膠的產生，小心有毒性試劑例如DMSO，并避免尖銳物品傷人等。廣州正規無血清細胞凍存液服務電話