PCR抑制劑是指那些在PCR反應中能夠干擾或阻礙DNA擴增的物質。這些物質通常來源于生物樣本本身或者樣本的收集和處理過程。以下是一些PCR抑制劑的特點:1.**多樣性**:PCR抑制劑可以是多種不同的化合物,包括膽酸鹽、尿素、血紅素、酚類化合物、蛋白質、多糖、植物或血液成分等。2.**來源**:它們可能來自血液(如血紅素)、尿液(如尿素)、糞便(如膽酸鹽)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化學物質(如酚類化合物)。3.**影響**:抑制劑可以影響DNA聚合酶的活性,干擾引物的退火,或與DNA模板發生非特異性結合,導致PCR擴增效率降低或特異性下降。4.**復雜性**:由于樣本來源的復雜性,不同的抑制劑可能需要不同的策略來克服。某些抑制劑可能通過物理方法(如離心、過濾)去除,而其他抑制劑可能需要化學處理或使用特定的PCR增強劑。5.**濃度依賴性**:抑制效果通常與抑制劑的濃度有關。在較低濃度下,某些抑制劑可能不會影響PCR,但隨著濃度增加,抑制效果會變得更加明顯。6.**特異性**:某些抑制劑可能對特定的DNA聚合酶或PCR體系有特定的影響。例如,一些抑制劑可能特別影響高GC含量的模板擴增。在蛋白質的晶體學研究中,去除糖鏈可以幫助獲得去糖基化的蛋白質,這有助于更清晰地解析蛋白質的三維結構。N-Boc-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe
磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中快速、高效地回收DNA片段的實驗工具。它通常包含特異性吸附核酸分子的納米磁珠和相應的緩沖液系統,能夠去除雜質,得到高質量的DNA回收產物。這種試劑盒適用于從TAE和TBE瓊脂糖凝膠中回收大小在100bp到30kb之間的DNA片段,回收效率通常可達70%左右。使用磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的主要優勢包括:1.操作簡便快速,整個回收過程大約只需30分鐘。2.無需離心,方便實現高通量和自動化的DNA回收。3.與柱式法相比,磁珠法對于長片段DNA的回收效率更高,可高出約20%。4.純化得到的DNA可以直接用于酶切、連接、測序等后續分子生物學實驗。磁珠法的操作過程通常包括以下步驟:1.將瓊脂糖凝膠在融膠液中迅速融解,使DNA充分釋放。2.DNA與磁珠特異性結合,通過磁分離快速高效地分離磁珠與溶液。3.經過洗滌去除雜質。4.使用洗脫液將DNA從磁珠上洗脫,獲得高純度的DNA樣品。此外,一些試劑盒的說明書還會提供具體的操作步驟和所需材料的清單,包括磁珠、融膠液、洗滌液、洗脫液等組分,以及可能需要自備的無水乙醇和磁分離裝置。在使用過程中,需要注意產品的保存條件和有效期,以及操作時的個人安全防護措施。Recombinant Human FLT3/Flk-2(His-Avi Tag)酵母重組表達N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達系統生產的酶。
dITP(脫氧肌苷三磷酸)在PCR(聚合酶鏈反應)擴增中的應用是特定和有限的。以下是dITP在PCR擴增中的一些關鍵點:1.**PCR擴增中的使用**:dITP可以在某些類型的PCR中替代部分dGTP,特別是在使用某些特殊的DNA聚合酶時,例如那些不具有校正(proofreading)功能的酶。2.**替代比例**:在PCR中,dITP通常不能完全替代dGTP,因為這樣做可能會抑制PCR擴增反應。通常推薦在PCR反應中使用10%的dITP來代替dGTP。3.**特殊DNA聚合酶**:某些高保真DNA聚合酶,如碧云天生產的Q6U?高保真DNA聚合酶,可以與dITP一起使用,以提高PCR擴增的特異性和效率。4.**dNTP/dITP混合物**:在一些PCR應用中,會使用dNTP/dITP混合物,其中包含2.5mM每種dNTP加上0.25mM的dITP,以優化擴增條件。5.**PCR反應條件**:dITP的使用可能需要優化PCR反應條件,包括退火溫度、Mg2+濃度和循環次數。6.**穩定性和儲存**:dITP溶液應儲存在-20°C或更低的溫度下,以保持其穩定性。使用時應避免多次凍融,以防止降解。7.**安全性和專業性**:dITP和其他PCR組分應由專業人員用于科研目的,不應在臨床診斷中使用。
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,屬于RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結合蛋白或輔助因子協同作用,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區域進行雜交,以完成鏈置換反應,且此酶本身不具有核酸酶活性。產品應用方面,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術。它在實驗中與T4UvsY重組酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,以優化RPA擴增反應。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,或者-20℃儲存有效期為2年,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的穩定性和活性。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,需要注意其保存液中甘油含量較高,建議單獨分裝保存,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,以確保安全。此外,該產品供科研使用,不應用于臨床診斷。跨膜蛋白在宿主細胞中的表達水平通常有點低,研發困難,對蛋白表達生產平臺技術要求極高。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發生RNA的降解,從而可以產生更高產量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通過點突變完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,這是一種重組蛋白,可有效保護RNA在高達55°C的溫度下不受RNases的降解。-緩沖液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他輔助成分,以支持cDNA合成反應。-有時還包括用于去除RNA樣品中污染的基因組DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作為PCR或實時PCR的模板直接使用,也適用于第二鏈cDNA合成或線性RNA放大。此外,可以在cDNA合成過程中加入放射性或非放射性標記的核苷酸,以便在包括微陣列在內的雜交實驗中作為探針使用。跨膜蛋白的跨膜區域的相互作用是連接膜外環境與細胞內環境的重要渠道。rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
GPCR家族是一類存在于生物體中的跨膜蛋白,它們可以識別并與外界分子相互作用,引發各種細胞內信號。N-Boc-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe
重組酶是一類能夠促進DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們在分子生物學、遺傳工程和細胞生物學中扮演著重要角色。重組酶的作用機制通常涉及識別特定的DNA序列,催化DNA鏈的斷裂和重新連接,從而實現遺傳物質的重組。重組酶的主要類型和功能包括:1.限制性內切酶**(RestrictionEnzymes):這些酶可以識別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具,用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶(Ligases):連接酶可以將兩個DNA片段連接在一起,形成穩定的DNA分子。在DNA克隆和修復過程中,連接酶用于封閉切割位點產生的缺口。3.整合酶(Integrases):整合酶能夠將一段DNA序列插入到宿主基因組的特定位置。它們在基因和遺傳工程中具有應用。4.轉座酶(Transposase):轉座酶可以催化DNA片段從一個位置移動到另一個位置,這種機制在基因組中存在,并且在遺傳多樣性和進化中起著作用。5.**重組酶**(Recombinases):如RecA蛋白和Rad51蛋白,它們在同源重組中發揮作用,促進DNA雙鏈斷裂的修復和遺傳物質的重組。6.DNA聚合酶:這類酶在DNA復制和修復中添加新的核苷酸,以現有DNA鏈為模板合成新的DNA鏈。
重組人TNFSF12蛋白(hFcTag)是一種在哺乳動物細胞中表達的重組蛋白,融合了hFc標簽,便于純化和檢測。TNFSF12(TumorNecrosisFactorSuperfamilyMember12),也稱為TWEAK(TNF-likeweakinducerofapoptosis),是TNF超家族的重要成員,廣參與免疫調節、細胞存活、炎癥反應和組織修復。它在多種生物學過程中發揮關鍵作用,尤其是在免疫細胞的啟動和組織損傷后的修復過程中。TNFSF12的功能與機制TNFSF12通過其胞外區與受體TNFRSF12A(也稱為TWEAKR或Fn14)結合,啟動下游的信號通路。TNFSF12的信號轉...