細胞凍存經驗談:選對凍存培養基才是王道：研究人員經常需要冷凍細胞并保存，以供后續實驗或臨床使用。基本過程相當簡單：慢慢冷凍細胞，將凍存管放入液氮中，并在需要時快速解凍。凍存培養基能支持細胞并防止冰晶形成。不過，Malfavon的體驗告訴我們，使用不同的凍存培養基，結果那可是大不同。一些經驗老道的研究人員自己制備凍存培養基。不過，那些面對脆弱細胞（比如原代和多能細胞）的研究人員，則更喜歡購買標準化的商業產品。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益，以避免細胞在解凍時凋亡。鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。廈門無血清細胞凍存液廠家

產品簡介我們經過長期的實驗研究與反復驗證，研發出一系列新型細胞凍存產品，能有效地提高常規細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產品質量穩定可靠，使用方便，助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統凍存方法，專注于后續實驗研究。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型細胞凍存液，所含化學成分明確，無動物源性成分，可一步實現細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護細胞免受冰晶和溶質損傷，適用于大多數常規細胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細胞及干細胞**凍存液，可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。上海正規無血清細胞凍存液供應商無血清細胞凍存液使用方法：按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

細胞凍存注意事項：1、從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存，但為對數生長期細胞。在凍存前一日換一次培養液;2、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍壞;3、凍存和復蘇用新配制的培養液。4、取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項特別重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致炸列。凍存液產品針對細胞凍存的特殊配方，能較大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復蘇率和活力。

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：DMSO快速稀釋會對細胞造成滲透性損傷，使存活率下降50%。對于DMSO凍存的細胞，復蘇后應緩慢稀釋成細胞懸液：1）凍存液：培養基=1:1稀釋成細胞懸液后離心，然后重懸至培養皿中培養，隔天換液；2）凍存液：培養基=1:10稀釋成細胞懸液，不用離心，直接放置到培養瓶中培養2-4小時后，換液。上述兩種方法都是比較常用的細胞復蘇方法，后者更適用于原代細胞或比較難養的細胞。液氮內的細胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細胞應一段時間內進行更替。一個細胞系在培養一個月后，可復蘇一管新的細胞確保其質量沒有發生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。無血清細胞凍存液的優勢：因不含血清，批次間差異小。

無血清細胞凍存液使用方法：選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1）按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2）按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4）加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。5）將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6）直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長期冷凍保存。含血清，細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。蘇州無血清細胞凍存液廠家推薦

無血清凍存液用途：無血清細胞凍存液用于醫院樣本庫細胞樣本保存。廈門無血清細胞凍存液廠家

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、液氮內的細胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細胞應一段時間內進行更替。一個細胞系在培養一個月后，可復蘇一管新的細胞確保其質量沒有發生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。2、細胞復蘇時，為保證獲得較高的存活率和接種率，應盡可能的快速完成復蘇，以避免在升溫過程中細胞內部晶體的產生。書面介紹的復蘇溫度是37℃-42℃，但是本人在實際操作中發現40℃環境下復蘇效果較好。3.復蘇時使用的培養基和凍存時使用的培養基中的血清盡量保證同一批次。廈門無血清細胞凍存液廠家