無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項：1.將分裝好的細胞凍存管，直接置于-80度冰箱過夜保存，次日投入液氮中保存即可備注：1、凍存過程中，第2步在冰袋附近操作時，低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封，否則在復蘇過程中有可能會炸（1）提前開啟水浴鍋，溫度調節到37（2）將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出，迅速置于水浴鍋中融化，盡量1min融化，時間越短，對細胞影響越小。（3）將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養基中充分混勻，（如細胞冷凍保存液為500ul，則加入到5ml新鮮培養基中，如細胞冷凍保存液位1ml，則加入10ml新鮮培養基中。）（4）混勻后立即離心，800轉，3min即可離心結束后棄上清，加入預溫的新鮮培養液。（5）混勻后分瓶置于二氧化碳培養箱中培養。（二氧化碳濃度根據培養基要求決定，通常為5%【注意事項】細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1～310cells/ml雜交瘤細胞1～310cells/ml某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。血清批次、品質間差異導致凍存液的批次間差異。廈門正規無血清細胞凍存液產品介紹

細胞凍存和復蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細胞培養液.細胞培養的傳代及日常維持過程中，在培養器具、培養液及各種準備工作方面都需大量的耗費，而且細胞一旦開始原代培養，它的各種生物特性都將逐漸發生變化并隨著傳代次數的增加和體外環境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細胞儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。廈門正規無血清細胞凍存液產品介紹凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。

產品簡介我們經過長期的實驗研究與反復驗證，研發出一系列新型細胞凍存產品，能有效地提高常規細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產品質量穩定可靠，使用方便，助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統凍存方法，專注于后續實驗研究。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型細胞凍存液，所含化學成分明確，無動物源性成分，可一步實現細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護細胞免受冰晶和溶質損傷，適用于大多數常規細胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細胞及干細胞**凍存液，可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。

無血清快速細胞凍存液凍存細胞復蘇方法：1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4.清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6.鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。無血清細胞凍存液產品性能：凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分。

細胞凍存秘籍：1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進展情況。一旦細胞變圓，輕輕敲擊細胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長培養基滅活胰酶?？赡苄枰獎×业囊埔翰僮鱽硎古囵B容器底部的剩余細胞脫落，或將細胞團塊分解成單細胞懸浮液。胰酶的去除或失活對于冷凍細胞至關重要。如果游離試劑不能直接滅活，可以通過下一步的離心去除。2.用15ml離心管收集細胞。取出樣本進行細胞計數，剩余的細胞懸液以約100×g離心5分鐘以獲得細胞沉淀。離心時，用細胞計數板對細胞進行計數。使用臺盼藍染液檢查細胞的活性。一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞。珠海無血清細胞凍存液廠家推薦

使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓。廈門正規無血清細胞凍存液產品介紹

無血清細胞凍存液的優點有哪些呢：很多所使用的傳統的細胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個小時（或隔夜保存也可以），較后再液氮的環境中進行長期的儲存。需要注意在-20℃的環境下保存不可超過1個小時，主要用以防止冰晶產生過大，造成細胞大量的死亡。對于無血清的細胞凍存液來說，其所含有的成分是：不含血清，含DMSO、pH調節劑、葡萄糖等各種細胞營養成分等。其中不含有動物來源性的蛋白，所以能夠減少各類的細菌、霉菌、支原體等帶來的污染，而且可以確保凍存細胞的安全。比較通用于各種動物的細胞株。廈門正規無血清細胞凍存液產品介紹