無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產品之間有更高的產品質量一致性。成分明確,無批次差異。可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率。即用型,無需現配,即開即用。通用型,適用于凍存各種細胞系,原代細胞。可微量,原位凍存,例如雜交瘤細胞的凍存,省時高效。存儲條件:儲存于4℃以下,質量保障期從產品的生產日期起,為期兩年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將產品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細胞凍存液產品特色:各批產品之間有更高的產品質量一致性。蕪湖正規無血清細胞凍存液直銷廠家
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。為什么要進行細胞凍存?連續培養的細胞系容易發生遺傳漂變,有限細胞系較終會發生衰老,所有培養的細胞都易受到微生物污染,即使運轉情況較好的實驗室也會遇到設備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,更換細胞系成本高昂,而且耗費時間,因此,十分有必要將細胞冷凍起來長期保存。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞溫州石家莊無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液使用方法:將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。
細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養液.細胞培養的傳代及日常維持過程中,在培養器具、培養液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦開始原代培養,它的各種生物特性都將逐漸發生變化并隨著傳代次數的增加和體外環境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。
無血清細胞凍存液:細胞凍存及復蘇是細胞培養技術中的重要技術,細胞凍存是細胞長期保存的重要手段。細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,其作用是將需要凍存的細胞懸浮于凍存液,供給細胞生命代謝所必須的營養物質,同時可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。在現有技術中,一般使用培養基、血清和二甲亞砜(DMSO)按照一定比例混合的方法來凍存細胞,DMSO用量為10%,過低的DMSO濃度會導致凍存效果欠佳,但高濃度的DMSO有較大毒性,會對細胞體造成傷害;且傳統凍存液配方中所使用的血清成本高,增加動物病原污染的可能性。此外,有研究表明長期與胎牛血清接觸的細胞會對溶液介質中的胎牛血清發生內吞,內吞胎牛血清后的間充質干細胞有可能發生某些蛋白表達的變化,應用于人體后可發生異種動物蛋白引起的免疫反應,不能直接用于臨床輸注。因此,利用含有血清的凍存液凍存的細胞會給臨床使用帶來一定的風險。同時另一些保護劑不能穿透細胞。
細胞凍存的注意事項:1.為保持細胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標準的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當溫度下降達-25℃時,下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時則可迅速凍入液氮中。因此要適當掌握凍存物下降入液氮中的速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時,宜先用細木棒伸入罐中探測液面位置,然后需用溫度計與凍存物并行的辦法,以觀測下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關系,當已掌握以上各參數和凍存技術熟練后,光按下降時間和下降距離便可獲理想凍存效果。凍存要求發生改變,因為凍存細胞要進行臨床應用。杭州深圳無血清細胞凍存液
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細胞凍存的操作步驟:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;2.取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;8.凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。蕪湖正規無血清細胞凍存液直銷廠家
無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞:1.將細胞凍存管由液態氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液,以新鮮培養基重懸細胞,移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基,并觀察細胞存活狀況。細胞凍存管一定要保證完全密...