無血清細胞凍存液:產品優勢:1.化學成分明確,無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫,細胞復蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩定保存數年。4.即用型產品,4℃可穩定保存。細胞凍存:1.收集融合率>90%的對數期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為1x106~1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩定凍存數年。6.如若長期保存,可在次日轉移至液氮中。無血清凍存液使用方法:將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。唐山正規無血清細胞凍存液報價
細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現用現配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點:1、在使用凍存液前,需要確保細胞凍存液已經完全融化,并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環境中保存。2、使用凍存液之前應該確保凍存前的細胞生長情況比較良好,比如說細胞需要處于對數生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間,為了保證可以發揮較佳的效果,建議將細胞凍存在液氮之中,這樣可以長時間的進行保存。如果說將細胞置于-80℃的環境下保存,那么保存的時間大約為1年。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家快速凍存即不需要經過梯度降溫,直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。
以前在另一家實驗室的時候,凍存細胞根本就沒有講究這些標準操作。凍存的細胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纖維細胞)、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。將細胞酶消化后直接參與離心,加入凍存液(含90%的血清和10%的DMS0),直接放在-80℃冰箱。兩三天后移入液氮中,較久保存,幾年后細胞的活力仍沒有什么受損,照常能復蘇,成活率高。但有三點須注意:(1)一是細胞的生長狀態要好,不能長得過稀,同樣也不能過密,細胞的狀態看起來相當健康。70%密度的要保存的細胞須再長24h才能全滿,萬一細胞狀態不好,可以酶消化后再繁殖一次;(2)凍存細胞的量要留心,不能太密也不能太稀,一般1OOmm培養皿的細胞凍存為3~4管;(3)存放在-80℃冰箱的時間不能過長,一兩天后轉移到液氮罐里。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細胞,半年還有30%~50%的細胞有活性,但一年的細胞就沒有活的。
無血清快速細胞凍存液保存條件:儲存于4℃以下。質量保障期從產品的生產日期起,為期2年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將產品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1、按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2、按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。3、取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4、加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6、直接將含細胞混合液的凍存管放入-70℃以下冰箱,長期冷凍保存。7、若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結的凍存管(放入-70℃以下冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。無血清細胞凍存液使用方法:按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。
無血清細胞凍存液的優點有哪些呢:很多所使用的傳統的細胞凍存液的成份主要是:新鮮的培養基,其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法:將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,接著在-20℃的條件下30分鐘,-80℃的條件下保存16-18個小時(或隔夜保存也可以),較后再液氮的環境中進行長期的儲存。需要注意在-20℃的環境下保存不可超過1個小時,主要用以防止冰晶產生過大,造成細胞大量的死亡。對于無血清的細胞凍存液來說,其所含有的成分是:不含血清,含DMSO、pH調節劑、葡萄糖等各種細胞營養成分等。其中不含有動物來源性的蛋白,所以能夠減少各類的細菌、霉菌、支原體等帶來的污染,而且可以確保凍存細胞的安全。比較通用于各種動物的細胞株。無血清凍存液注意事項:若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家
在冰袋附近操作時,低溫避免保護劑對細胞造成損傷。唐山正規無血清細胞凍存液報價
無血清細胞凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規細胞),大部分的干細胞,凍存細胞可在-80℃長期保存。不含動物源性蛋白,不含血清成分,可有效減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。產品優勢:1、無需程序性降溫,可直接將細胞置于-80℃凍存,凍存液無需稀釋。2、細胞可于-80℃長期保存。3、凍存液不含血清等,較大降低細胞污染的可能性。保存方法:冰袋運輸,4℃保存,保質期一年。唐山正規無血清細胞凍存液報價
無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞:1.將細胞凍存管由液態氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液,以新鮮培養基重懸細胞,移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基,并觀察細胞存活狀況。細胞凍存管一定要保證完全密...