復蘇方:法1)從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4)清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細胞培養基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。無血清細胞凍存液產品性能:胎牛血清取自牛,因此,難以應用到需要避免接觸動物源的應用領域。無錫昆明無血清細胞凍存液
無血清凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。該產品添加了細胞沉降穩定劑,可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率,防止細胞互相擠壓,影響細胞凍存效果。另外,添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑,這些成分在溶液中同水分子結合,發生水合作用,弱化水的結晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,能較大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷,有效提高細胞復蘇存活率。該產品配方成分明確,不含血清、不含動物源性蛋白,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全;不光適用于常規細胞系、原代細胞,同時亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。金華正規無血清細胞凍存液產品介紹即用型產品,4℃可穩定保存。
細胞凍存的注意事項:1.為保持細胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標準的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當溫度下降達-25℃時,下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時則可迅速凍入液氮中。因此要適當掌握凍存物下降入液氮中的速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時,宜先用細木棒伸入罐中探測液面位置,然后需用溫度計與凍存物并行的辦法,以觀測下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關系,當已掌握以上各參數和凍存技術熟練后,光按下降時間和下降距離便可獲理想凍存效果。
產品簡介我們經過長期的實驗研究與反復驗證,研發出一系列新型細胞凍存產品,能有效地提高常規細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產品質量穩定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統凍存方法,專注于后續實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細胞凍存液,所含化學成分明確,無動物源性成分,可一步實現細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質損傷,適用于大多數常規細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。
細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細胞內的水份滲出細胞外,減少細胞內形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內,再次形成胞內冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。無血清細胞凍存液產品特色:即用型,無需現配,即開即用。寧波無血清細胞凍存液單價
無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。無錫昆明無血清細胞凍存液
含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品質間差異導致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。Cellregen無血清細胞凍存液的凍存方法是:將細胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長期保存。無錫昆明無血清細胞凍存液
無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞:1.將細胞凍存管由液態氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液,以新鮮培養基重懸細胞,移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基,并觀察細胞存活狀況。細胞凍存管一定要保證完全密...