無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比:細胞凍存是細胞培養技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,其中細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,不光光是說只是用來進行細胞的保存,在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞,細胞內和外環境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑,在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中,可使冰點降低,提高細胞膜對水的通透性,在緩慢的凍結條件下,能使細胞內水份在凍結前透出細胞,可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性。細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。杭州濟南無血清細胞凍存液
細胞凍存,我們應該注意哪些事項:DMSO快速稀釋會對細胞造成滲透性損傷,使存活率下降50%。對于DMSO凍存的細胞,復蘇后應緩慢稀釋成細胞懸液:1)凍存液:培養基=1:1稀釋成細胞懸液后離心,然后重懸至培養皿中培養,隔天換液;2)凍存液:培養基=1:10稀釋成細胞懸液,不用離心,直接放置到培養瓶中培養2-4小時后,換液。上述兩種方法都是比較常用的細胞復蘇方法,后者更適用于原代細胞或比較難養的細胞。液氮內的細胞凍存較長時間不要超過半年,凍存在液氮中的細胞應一段時間內進行更替。一個細胞系在培養一個月后,可復蘇一管新的細胞確保其質量沒有發生太大變化,傳代幾次后,再凍存留種。廣州正規無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液使用方法:直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長期冷凍保存。
細胞凍存:就凍存細胞而言,為了防止細胞在溫度下降時產生胞內細微冰晶,其溫度的下降不能太快。標準的操作是每一分鐘下降一度。有以下三種建議:(1)優先推薦使用程控降溫儀。(2)其次,加有異丙醇的細胞凍存盒,基本上也可以保證每分鐘1℃左右的降溫速度;(3)還有一些普遍的簡易凍存方法。如4℃半小時,-20℃半小時,然后-80℃過夜,再放入液氮;用泡沫盒(裝15mL離心管的那種)加一個保鮮袋,直接放在-80℃凍存;也可以用紗布做成袋子,將細胞懸掛在液氮上方,隔天轉入液氮;在凍存管外面包上棉花,直接放在-80℃冰箱就能夠達到緩慢降溫的效果;有的時候如果確實比較緊急的話,向96孔凍存盒的內部加滿自來水,再將凍存管放置孔中,直接置于-80℃,這樣也能夠達到緩慢降溫的目的。
細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液,4℃預冷(新鮮配制的凍存液會產生大量的熱);取對數生長期的細胞,用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來;懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中;離心1200rpm,6min;去除上清液,逐漸加入適量預冷的細胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;到達-80℃時,則可迅速放入液氮中。無血清細胞凍存液產品性能:既適用于一般培養細胞的凍存,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。
無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產品之間有更高的產品質量一致性。成分明確,無批次差異。可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率。即用型,無需現配,即開即用。通用型,適用于凍存各種細胞系,原代細胞。可微量,原位凍存,例如雜交瘤細胞的凍存,省時高效。存儲條件:儲存于4℃以下,質量保障期從產品的生產日期起,為期兩年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將產品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細胞凍存液可用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。開封無血清細胞凍存液廠家推薦
無血清凍存液特性:適合各種動物細胞。杭州濟南無血清細胞凍存液
隨著細胞治理以及細胞儲存產業發展,細胞凍存也面臨從科研應用走向產業轉化。凍存要求發生改變,因為凍存細胞要進行臨床應用,所以凍存液成分由原來血清變為無血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。隨著細胞凍存數量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應運而生。目前針對細胞治理領域,推出一款即用型的無血清細胞凍存液,這款產品是細胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點,凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、等間充質干細胞,免疫細胞以及大多數細胞系凍存。同時該款所有成分均使用藥用級原料配制而成,完全適應細胞儲存,細胞治理以及科學研究等不同場景使用。杭州濟南無血清細胞凍存液
無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞:1.將細胞凍存管由液態氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液,以新鮮培養基重懸細胞,移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基,并觀察細胞存活狀況。細胞凍存管一定要保證完全密...