血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿比較大的區別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。無血清細胞凍存液使用方法:緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。重慶無血清細胞凍存液廠家
凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細胞系。細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。溫州正規無血清細胞凍存液直銷廠家無血清細胞凍存液可用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短,不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結果帶來了不穩定性。
復蘇方:法1)從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4)清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細胞培養基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。無血清細胞凍存液的優勢:通用型,適用于凍存各種細胞系、原代細胞。
細胞凍存經驗談:選對凍存培養基才是王道:研究人員經常需要冷凍細胞并保存,以供后續實驗或臨床使用。基本過程相當簡單:慢慢冷凍細胞,將凍存管放入液氮中,并在需要時快速解凍。凍存培養基能支持細胞并防止冰晶形成。不過,Malfavon的體驗告訴我們,使用不同的凍存培養基,結果那可是大不同。一些經驗老道的研究人員自己制備凍存培養基。不過,那些面對脆弱細胞(比如原代和多能細胞)的研究人員,則更喜歡購買標準化的商業產品。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益,以避免細胞在解凍時凋亡。無血清細胞凍存液產品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省錢)。重慶無血清細胞凍存液廠家
無血清細胞凍存液:為多種保護劑組合,在細胞內外進行雙重保護,較大提高了細胞復蘇存活率。重慶無血清細胞凍存液廠家
細胞凍存是將細胞放在低溫環境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中,細胞凍存液中的主要成分有10%二甲基亞砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質,成分比較復雜,在臨床應用上存在潛在的風險,也增加了污染的幾率,并且由于凍存液中含有動物血清,會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。重慶無血清細胞凍存液廠家
無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。復蘇細胞:1.將細胞凍存管由液態氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養基、無菌15ml離心管、培養瓶。2.于生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液,以新鮮培養基重懸細胞,移到培養瓶中培養。5.隔天更換新鮮培養基,并觀察細胞存活狀況。細胞凍存管一定要保證完全密...