PCR預混合溶液是一種為聚合酶鏈反應(PCR)實驗預先配制好的混合試劑,它包含進行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。這種預混合溶液的設計旨在簡化實驗步驟,減少實驗過程中的誤差,提高實驗的重復性和效率。通常,PCR預混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:負責在PCR過程中合成新的DNA鏈。-**dNTPs**(脫氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**緩沖體系**:提供適宜的pH和離子環境,保證DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作為DNA聚合酶的輔助因子,影響酶的活性和PCR的特異性。-**穩定劑**:延長預混合溶液的有效期和穩定性。-**染料**(可選):如溴酚藍或類似物質,用于在電泳時觀察DNA條帶。PCR預混合溶液的使用可以減少實驗者在每次實驗時手動添加各種成分的需要,從而節省時間并降低污染的風險。此外,一些預混合溶液還可能包含其他添加劑,比如增強劑或保護劑,以提高PCR的效率和穩定性。His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Rat IL-22
5'DNA腺苷?;噭┖械膯尾椒磻且环N高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷?;福?、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷?;?,這一步是為了防止后續的去腺苷酰化現象,確保反應的穩定性。4.**產物收集**:-由于轉化效率高,通常不需要進行凝膠純化步驟。可以通過乙醇沉淀等方法收集腺苷?;蟮腄NA產物。5.**產物應用**:-收集的腺苷?;疍NA可以直接用于后續的克隆、測序、連接或其他分子生物學實驗。6.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環境中進行,以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性,確保底物、酶和ATP的比例適當。單步反應的優勢在于簡化了操作流程,減少了樣品處理的復雜性,并且由于高轉化效率,避免了耗時的純化步驟,從而節省了時間和成本。Recombinant Mouse IL-18BP Protein,His Tag可以利用現有的計算工具,如CRISPR design tools,預測gRNA的活性和特異性,以輔助實驗設計 。
5'DNA腺苷酰化試劑盒的適用性非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**miRNA克隆**:該試劑盒可用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆時,3'端添加接頭的制備。2.**高通量測序建庫**:在高通量測序中,該試劑盒可用于制備5'端腺苷酰化修飾的單鏈DNA,這些DNA可以用于測序文庫的構建。3.**PCR檢測**:在PCR檢測中,該試劑盒可以幫助制備具有特定5'端修飾的DNA片段,以適應某些PCR應用的需求。4.**單鏈DNA或RNA的5'端腺苷?;?*:試劑盒可以催化5'端磷酸化的單鏈DNA或單鏈RNA轉換成5'端腺苷?;疍NA或RNA,無論3'端是否進行了氨基化等封閉。5.**環狀DNA生成**:在不存在ATP的條件下,5'DNA/RNAAdenylase可以催化5'端磷酸化的單鏈DNA生成環狀DNA。6.**RNALigation**:該試劑盒包含的MthRNA連接酶,可以用于RNA的連接反應,尤其是在需要5'端腺苷?;疍NA作為連接接頭時。7.**科研實驗**:所有提到的產品信息都明確指出,5'DNA腺苷?;噭┖杏糜诳蒲袑嶒?,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途。
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,它是RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復和復制叉重新啟動的過程中起到重要作用。T4UvsX重組酶可以通過與其他DNA結合蛋白或輔助因子一起與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物,并通過尋找與靶標DNA的互補區域進行雜交,以完成鏈置換反應。此外,T4UvsX重組酶在生產時由大腸桿菌表達和純化。T4UvsX重組酶的產生過程涉及到基因工程和蛋白質表達的常規技術。首先,T4噬菌體的基因序列被識別并克隆到適合的表達載體中,然后這個載體被轉化到大腸桿菌宿主細胞中。在宿主細胞內,T4UvsX基因被轉錄和翻譯,產生重組酶蛋白。隨后,通過一系列步驟包括細胞培養、蛋白質表達、細胞裂解、蛋白質純化等,獲得所需的T4UvsX重組酶。這一過程通常在生物技術實驗室中進行,并且需要精確的分子生物學操作和蛋白質工程知識。
重組酶是一類能夠促進DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們在分子生物學、遺傳工程和細胞生物學中扮演著重要角色。重組酶的作用機制通常涉及識別特定的DNA序列,催化DNA鏈的斷裂和重新連接,從而實現遺傳物質的重組。重組酶的主要類型和功能包括:1.限制性內切酶**(RestrictionEnzymes):這些酶可以識別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具,用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶(Ligases):連接酶可以將兩個DNA片段連接在一起,形成穩定的DNA分子。在DNA克隆和修復過程中,連接酶用于封閉切割位點產生的缺口。3.整合酶(Integrases):整合酶能夠將一段DNA序列插入到宿主基因組的特定位置。它們在基因和遺傳工程中具有應用。4.轉座酶(Transposase):轉座酶可以催化DNA片段從一個位置移動到另一個位置,這種機制在基因組中存在,并且在遺傳多樣性和進化中起著作用。5.**重組酶**(Recombinases):如RecA蛋白和Rad51蛋白,它們在同源重組中發揮作用,促進DNA雙鏈斷裂的修復和遺傳物質的重組。6.DNA聚合酶:這類酶在DNA復制和修復中添加新的核苷酸,以現有DNA鏈為模板合成新的DNA鏈。
與Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase產生的PCR產物為平滑末端,無3'端"A"突出。Recombinant Rat IL-22
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發生RNA的降解,從而可以產生更高產量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通過點突變完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,這是一種重組蛋白,可有效保護RNA在高達55°C的溫度下不受RNases的降解。-緩沖液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他輔助成分,以支持cDNA合成反應。-有時還包括用于去除RNA樣品中污染的基因組DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作為PCR或實時PCR的模板直接使用,也適用于第二鏈cDNA合成或線性RNA放大。此外,可以在cDNA合成過程中加入放射性或非放射性標記的核苷酸,以便在包括微陣列在內的雜交實驗中作為探針使用。Recombinant Rat IL-22
重組人SR-BI蛋白是一種在哺乳動物細胞中表達的重組蛋白,融合了hFc標簽,便于純化和檢測。SR-BI(Scavenger Receptor Class B Type I)是一種清道夫受體,主要參與膽固醇的逆向轉運和高密度脂蛋白(HDL)的代謝,在維持膽固醇穩態中發揮重要作用。SR-BI在心血管疾病、病和脂質代謝紊亂的研究中具有重要的應用價值。SR-BI的功能與機制SR-BI是膽固醇逆向轉運的關鍵受體,通過選擇性攝取HDL中的膽固醇,將其轉運至肝臟和類固醇生成組織,進而促進膽固醇的排泄和膽汁酸的合成。這一過程對于維持膽固醇穩態至關重要。此外,SR-BI還參與調節脂質代謝、炎癥反應和細胞凋亡,其...