Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(hào)(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過(guò)熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無(wú)DNA:沒(méi)有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測(cè)方法的選擇。可應(yīng)用于:通過(guò)體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過(guò)電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。在某些疾病中,特定蛋白質(zhì)的泛素化水平可能發(fā)生變化,因此,泛素化蛋白質(zhì)可以作為疾病的生物標(biāo)志物。Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS?CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.Recombinant Human Ephrin-A4/EFNA4 Protein,hFc Tag全長(zhǎng)跨膜蛋白是一類特殊的蛋白質(zhì),它們嵌入在細(xì)胞膜的磷脂雙分子層中,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)外的跨越。
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式,涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶,能夠特異性地識(shí)別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來(lái)源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成:一個(gè)負(fù)責(zé)識(shí)別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對(duì)N-連接糖鏈的特異性識(shí)別和切割。酶的活性位點(diǎn)含有多個(gè)氨基酸殘基,這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用,導(dǎo)致酶對(duì)底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng),需要水分子的參與。
分子結(jié)構(gòu):牛纖維蛋白原由兩個(gè)相似的三聚體亞基組成,每個(gè)亞基包含Aα、Bβ和γ三個(gè)多肽鏈,通過(guò)二硫鍵和非共價(jià)鍵連接。生物學(xué)功能:牛纖維蛋白原在凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中被凝血酶裂解為纖維蛋白單體,進(jìn)而聚合形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊,是止血和傷口修復(fù)的關(guān)鍵組分。醫(yī)學(xué)應(yīng)用:牛纖維蛋白原在心血管疾病、創(chuàng)傷以及藥物開(kāi)發(fā)中展現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價(jià)值。討論分子特性:牛纖維蛋白原的分子結(jié)構(gòu)為理解其在凝血過(guò)程中的功能提供了基礎(chǔ),同時(shí)為設(shè)計(jì)新型抗凝血藥物提供了可能。疾病研究:牛纖維蛋白原在血栓形成和溶解中的作用,為研究如深靜脈血栓、心肌梗死等疾病的分子機(jī)制提供了重要信息。生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用:牛纖維蛋白原的穩(wěn)定性和可用性使其成為研究血液凝固機(jī)制和開(kāi)發(fā)新型生物材料的理想模型。酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過(guò)酵母重組表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的酶。
α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經(jīng)蛋白水解活化而來(lái)。它在凝血過(guò)程中起著非常重要的作用,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來(lái)尋找前輔因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi),活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過(guò)二硫鍵連接而成。某些情況下,α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對(duì)α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段(B1,B2)組合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶還常用來(lái)位點(diǎn)特異性切割融合蛋白。基因重組時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間,通過(guò)凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過(guò)親和層析技術(shù)快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡(jiǎn)稱HA)是一種存在于人體和動(dòng)物組織中的天然高分子多糖,稱為糖醛酸或玻尿酸。Recombinant Mouse IL-18RAP Protein,His Tag
高親和力和選擇性A2AR抑制劑的開(kāi)發(fā):研究者正在開(kāi)發(fā)新型的A2AR小分子拮抗劑,以提高藥物的療效和選擇性。Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制劑(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).儲(chǔ)存條件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.Recombinant Biotinylated Human VEGF165 Protein,His-Avi Tag
重組人SLAMF6蛋白是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,主要包含SLAMF6的胞外區(qū),融合了hFc標(biāo)簽,便于純化和檢測(cè)。SLAMF6(Signaling Lymphocyte Activation Molecule Family Member 6),也稱為NTB-A(Natural Killer T-Binding Antigen),是SLAM家族的重要成員,廣表達(dá)于免疫細(xì)胞(如T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)表面,通過(guò)同型或異型相互作用調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的啟動(dòng)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。SLAMF6的功能與機(jī)制SLAMF6在免疫細(xì)胞的啟動(dòng)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用。它通過(guò)與自身或其他SLAM家族成員(如SL...