上海交通大學醫學院附屬上海兒童醫學中心:周斌兵課題組近期在《Leukemia》期刊上發表成果,指出堿基切除修復通路關鍵聚合酶 polβ在介導錯配修復缺陷的急性淋巴細胞白血病(ALL)細胞對巰嘌呤耐藥和存活中發揮重要作用。研究發現,polβ抑制劑與 6-TG 聯合使用時對錯配修復缺陷細胞表現出明顯的協同效應,并在 ALL 細胞系、病人來源的原代細胞和異種移植小鼠模型多個層面驗證了其在復發難治型 ALL 中的***潛力。該研究為進一步優化兒童 ALL 巰嘌呤臨床精細用***案奠定了理論基礎。DNA 連接酶與 DNA 聚合酶功能不同,前者連接 DNA的片段缺口,后者催化新鏈合成。廣西熱穩定型DNA聚合酶廠家
高保真DNA聚合酶(High-Fidelity DNA Polymerase)是一類能夠在高精度下復制DNA模板的酶,其重心特性在于具有強大的3'→5'外切酶活性,能夠在DNA合成過程中識別并修復錯誤插入的核苷酸,從而顯著提高DNA復制的準確性。這種酶不僅具備5'→3'的聚合酶活性,用于沿模板鏈合成DNA,還通過其校正功能減少突變的發生。
保真度:指DNA聚合酶在復制DNA時的準確性,即酶在合成DNA過程中正確插入核苷酸的能力。高保真度意味著酶能夠更準確地復制模板DNA,減少錯誤摻入的核苷酸,從而降低突變的發生率。 廣西熱穩定型DNA聚合酶廠家DNA聚合酶合成DNA,RNA聚合酶合成RNA,二者底物和產物不同。
清華大學生命學院:孫前文實驗室于2023年11月27日在《Nature Communications》期刊發表論文,揭示了擬南芥中 DNA 聚合酶ε參與調控 topoR-loop 動態變化和 DNA 復制進程,進而維持基因組完整性的分子機制。該研究表明,DNA 聚合酶ε可響應基因組拓撲結構變化,協同調控 r-loop 動態變化和 DNA 復制進程,其發現對深入理解人類**化療過程中 atm 缺陷導致 top1i 靶向藥物耐藥性的機制提供了重要信息,同時為聯合使用 DNA 損傷藥物和分層***提供可能的新策略。
DNA聚合酶是否作用于氫鍵?DNA聚合酶的催化作用不直接涉及氫鍵的形成或斷裂,其重要功能是催化磷酸二酯鍵的形成。具體而言:(1)氫鍵的作用:DNA聚合酶以單鏈DNA為模板時,模板與新鏈的堿基對(A-T、G-C)通過氫鍵配對,這一過程由堿基互補配對原則驅動,而非酶直接催化。酶的作用是識別正確配對的堿基對,并催化dNTP的α-磷酸與引物3'-OH形成磷酸二酯鍵。(2)間接依賴氫鍵:若模板鏈存在二級結構(如發卡結構),氫鍵維持的結構可能阻礙聚合酶移動,此時需解旋酶先解開雙鏈(破壞氫鍵),聚合酶才能繼續合成。(3)與解旋酶的分工:解旋酶作用于氫鍵,解開DNA雙鏈;聚合酶作用于磷酸二酯鍵,延伸新鏈,二者功能但協同完成復制。DNA酶可水解DNA分子,將其分解為小分子核苷酸,主要用于DNA的降解和某些生物化學反應中的DNA處理。
DNA聚合酶的研究也為基因工程和生物技術帶來了巨大的突破。通過對其特性的深入了解,科學家們能夠設計和優化體外DNA合成反應,實現基因的克隆、重組和測序等重要技術。例如,在聚合酶鏈式反應(PCR)中,選擇合適的DNA聚合酶可以**提高反應的特異性和效率,使得從微量的DNA樣本中擴增出特定的基因片段成為可能,為疾病診斷、法醫鑒定和生物學研究提供了有力的工具。在細胞應對外界壓力和應激反應時,DNA聚合酶的功能也會發生相應的調整。當細胞受到紫外線照射或化學誘變劑的攻擊時,一些特殊的DNA聚合酶會被***,參與到損傷修復的過程中。它們能夠容忍一定程度的堿基錯配,以盡快填補損傷造成的缺口,維持DNA的完整性。這種應激適應性機制雖然可能引入少量錯誤,但在短期內保障了細胞的生存,為后續的精確修復爭取了時間。 Taq DNA 聚合酶源于嗜熱菌,適用于 PCR 高溫變性步驟,推動分子生物學快速發展。廣西熱穩定型DNA聚合酶廠家
Pfu DNA聚合酶具有高保真性,用于精確擴增,它在分子生物學實驗中具有廣泛的應用。廣西熱穩定型DNA聚合酶廠家
DNA聚合酶在應對各種復雜的DNA結構和環境時,展現出了非凡的適應性和靈活性。當遇到DNA鏈上的損傷或扭曲時,它并不會輕易放棄,而是會嘗試尋找解決辦法。在某些情況下,DNA聚合酶能夠繞過損傷部位,暫時合成一段不完美的鏈,然后等待后續的修復機制來修正錯誤。這種跨損傷合成的能力雖然可能引入一些錯誤,但卻保證了DNA復制的連續性,避免了細胞因DNA損傷而停滯不前。另外,DNA聚合酶還能夠與其他蛋白質相互協作,共同應對DNA結構上的挑戰。例如,與解旋酶合作,解開緊密纏繞的雙螺旋結構,為DNA聚合酶提供清晰的模板;與拓撲異構酶協同,解決DNA超螺旋帶來的張力問題,確保復制過程的順利進行。廣西熱穩定型DNA聚合酶廠家
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