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使用研磨儀、研磨棒或者使用超聲破碎細胞的方法破碎細胞,加入去污劑,如sds等,除去膜脂。去除細胞內的蛋白質,包括與DNA結合的組蛋白,通過加入蛋白酶,醋酸鹽沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如實驗不嚴密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或異丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分鐘以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起發生沉淀。總結:DNA提取方法有下面⑦種一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎細胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與DNA的結合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態)五.表面活性劑快速制備法:用TritonX-100A或NP40表面活性劑破碎細胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應。七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和。
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傳統棉簽由于其頂端棉纖維纏繞而成的內部結構,使得在采樣時樣本會被其纖維團分散且滯留在纖維中。四川植絨拭子歡迎咨詢
3505C植絨拭子(法醫專用)*一代DNA樣品采集工具,尤其適用于接觸DNA、微量DNA物證采集,獲多國。意大利華晨陽公司生產的4N6FLOQSwabsTM植絨拭子已在中國、美國、歐洲、日本等多個國家和地區獲得了技術,專門為犯罪現場采集口腔細胞、唾液、精液、血斑、皮屑等檢材設計,尤其適用于微量DNA的采集。4N6FLOQSwabsTM植絨拭子采用技術的尼龍纖維植絨填充技術,其頂部為垂直于基底的尼龍纖維結構,這種結構可*限度的提高DNA采集和洗脫效率。傳統的棉簽/纖維拭子在采樣時,樣本會被其纖維團分散且滯留在纖維中,而4N6FLOQSwabsTM植絨拭子采樣時,全部的樣本都會被保存至尼龍纖維的近表面處,以保證快速且完全的洗脫和釋放。適用范圍:適用于法醫、*機關DNA實驗室人員和基層*系統現場勘查人員及司法鑒定機構使用。經瑞捷(RapidHIT)DNA快速檢測儀測試,對接觸DNA的檢出率華晨陽植絨拭子的效果明顯優于傳統棉簽。3505C植絨拭子(法醫專用)產品特點采用的尼龍植絨技術,樣本吸收更加快速新穎的折點設計,讓拭子輕松折斷并進入管中,更加便于操作*限度的樣本洗脫及轉移,對微量DNA樣本采集尤為出色經過***劑的特殊處理,防止微生物污染GMP標準生產,封閉式包裝,無菌、無酶、無***劑。四川植絨拭子歡迎咨詢
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