熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對 PCR 產物進行標記跟蹤,實時監測反應過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個 PCR 進程。隨著 PCR 擴增的進行,每經過一個循環,熒光信號就會相應增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴增情況,進而實現對初始模板的定量分析。常用的熒光化學物質有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR 擴增時,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地摻入 DNA 雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產物的增加完全同步。而熒光探測器則能夠準確地捕捉到這些微弱的熒光信號,并將其轉化為電信號或數字信號進行分析。熒光定量PCR儀價格
多重熒光定量 PCR:在同一反應體系中同時檢測多個目標基因時,VIC 熒光染料可與其他不同發射波長的熒光染料(如 FAM、ROX 等)組合使用。由于 VIC 的光譜特性與其他染料有較好的區分度,能避免熒光信號之間的相互干擾,從而實現對多個不同目標基因的同時定量分析。例如,在疾病診斷中,可同時檢測多個與疾病相關的基因標志物,提高診斷的準確性和全面性。SNP 基因分型:在單核苷酸多態性(SNP)檢測中,通過設計特定的引物和探針,利用 VIC 熒光染料標記不同等位基因的探針。在 PCR 反應過程中,根據不同等位基因與探針的特異性結合,產生不同的熒光信號,從而實現對 SNP 位點的分型。這種方法具有較高的準確性和靈敏度,可用于疾病關聯研究、藥物遺傳學研究以及個體遺傳特征分析等領域。QPCR熒光定量PCR儀結核分枝桿菌的檢測,傳統的培養方法需要數周時間;
實時熒光定量 PCR 儀在多個領域都有廣泛的應用,以下是一些主要的應用領域:疾病診斷:可對病毒、細菌等病原體的核酸進行檢測,如、病毒、結核桿菌等,實現疾病的早期診斷。例如,在期間,實時熒光定量 PCR 儀是檢測核酸的重要工具,通過檢測患者樣本中病毒的核酸量,判斷是否以及的程度。疾病監測:對于一些慢性疾病,如、心血管疾病等,實時熒光定量 PCR 儀可監測相關基因的變化,輔助醫生了解疾病的發展進程、效果以及預測疾病的復發風險。例如,通過檢測患者體內特定基因突變的頻率和拷貝數,評估的惡性程度和后的殘留情況。藥物研發:在藥物研發過程中,可用于研究藥物對基因表達的影響,篩選具有潛在作用的藥物靶點。同時,還可監測藥物過程中患者體內基因的變化,為個體化提供依據。例如,通過檢測患者在使用某種藥物前后腫瘤細胞中相關基因的表達水平,判斷藥物是否有效,并調整方案。
杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9600Pro作為一款**PCR儀器,其配備了一塊,這一設計在實驗過程中起著至關重要的作用。通過實時監控運行狀態,用戶可以直觀地了解PCR實驗的進展情況,保證實驗操作的準確性和實驗數據的可靠性。,為用戶提供了更為清晰、直觀的實驗信息展示界面。在進行PCR實驗的過程中,用戶可以通過顯示屏實時監控儀器的運行狀態、反應曲線、溫度曲線等關鍵數據,了解實驗進展情況,及時發現異常情況并采取相應措施。這種即時的反饋和監控功能,有助于用戶提前發現實驗中可能存在的問題,減少實驗失敗的可能性,保證實驗數據的準確性和可靠性。另外,,使得操作更加便捷、直觀。用戶可以通過觸摸屏或按鈕操作來進行儀器的控制和設置,從而實現快速、準確的實驗操作。顯示屏上顯示的實驗參數、曲線圖等信息清晰可見,使得用戶能夠輕松地進行數據分析和實驗結果的解讀。通過實時監控運行狀態,。用戶可以隨時查看儀器的運行日志和歷史數據,了解實驗過程中的各個環節,方便進行實驗結果的復現和對比分析。這種數據記錄和追溯功能,有助于用戶更好地管理實驗數據,保證實驗的可追溯性和科研成果的可靠性。 強度高且穩定的光源能保證 TET 染料被充分激發,而高靈敏度、低噪聲的探測器可準確捕捉微弱熒光信號。
熒光標記探針法原理:使用一種特異性的熒光標記探針,它能與目標 DNA 序列雜交。探針的 5' 端標記有熒光報告基團,3' 端標記有熒光淬滅基團。在游離狀態下,報告基團發出的熒光會被淬滅基團吸收,無法檢測到熒光信號。當 PCR 反應進行時,DNA 聚合酶在延伸引物的過程中,會將探針水解,使報告基團與淬滅基團分離,報告基團發出的熒光信號就可以被儀器檢測到。每擴增一條 DNA 鏈,就會有一個探針被水解,釋放出一個熒光信號,熒光信號的強度與 PCR 產物的數量成正比。過程:在 PCR 反應的退火階段,熒光標記探針會與目標 DNA 序列特異性結合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性會將探針從 5' 端開始逐個水解,使報告基團游離出來,產生熒光信號。儀器會在每個循環的延伸階段檢測熒光信號的強度,隨著 PCR 反應的進行,熒光信號逐漸增強,同樣可以得到 Ct 值。定量依據:與熒光染料法類似,通過標準品建立標準曲線,根據待測樣本的 Ct 值在標準曲線上計算出起始模板量。由于熒光標記探針具有特異性,能與特定的目標序列雜交,因此可以更準確地對目標基因進行定量分析,減少非特異性擴增的干擾。升降溫速度慢則會使實驗時間延長,也可能影響擴增效率。泰州 ROX熒光定量PCR儀詢問報價
具備多個熒光檢測通道,可同時檢測多種熒光染料;熒光定量PCR儀價格
熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應體系中,隨著 DNA 擴增產物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結合的熒光染料也越來越多,熒光信號強度與 PCR 產物的數量呈正相關。通過檢測熒光信號的強度變化,就可以實時監測 PCR 反應的進程。過程:在 PCR 反應的每一個循環中,當溫度降低到退火溫度時,引物與模板結合,DNA 聚合酶開始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時,熒光染料會結合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會在特定的時間點檢測熒光信號的強度。隨著循環次數的增加,熒光信號逐漸增強,當信號強度達到設定的閾值時,對應的循環數被稱為閾值循環數(Ct 值)。定量依據:在一定的范圍內,起始模板量與 Ct 值呈對數關系。即起始模板量越多,達到閾值所需的循環數越少,Ct 值越小;反之,起始模板量越少,Ct 值越大。通過已知濃度的標準品建立標準曲線,再根據待測樣本的 Ct 值,就可以在標準曲線上計算出其對應的起始模板量。熒光定量PCR儀價格