石家莊正規細胞高效轉染試劑廠家供應
細胞轉染常用步驟:1.轉染試劑的準備①將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。②震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。2.選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。3.將混合液在室溫放置10―15分鐘。4.吸去培養板中的培養基,用PBS或者無血清培養基清洗一次。5.加入混合液,將細胞放回培養箱中培養一個小時。6.到時后,根據細胞種類決定是否移除混合液,之后加入完全培養基繼續培養24-48小時加入混合液,將細胞...
發布時間:2024.07.26昆明細胞高效轉染試劑產品介紹
細胞轉染的原理、操作步驟以及小技巧:一、脂質體(Liposome)轉染方法原理脂質體作為體內和體外輸送載體的工具,已經研究的十分普遍,中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。優點:與其它方法相比,有較高的效率和較好的重復性,它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前條件下較方便的轉染方法之一通過緩沖液的作用以及脂質與內體膜融合,增大內體的內部滲透壓。昆明細胞高效轉染試劑產品介紹細胞...
發布時間:2024.07.19金華細胞高效轉染試劑產品介紹
細胞轉染效率影響因素:1.細胞密度一般來說,當細胞密度達到60%~80%時進行轉染可以取得較高的轉染效率,過低或過高都會影響轉染效果。2.細胞生長狀態這點非常關鍵,很多時候傳代次數太少或者太多都將導致細胞對轉染試劑敏感度的改變。因此,為了提高轉染效率以及轉染穩定性、降低細胞毒性,應盡量使用適度傳代的細胞系,并在不同次實驗時保持細胞傳代次數的一致性。3.細胞種類不同細胞種類的細胞在做轉染時所需要的轉染體系是不同的,不能一種體系用在所有類型細胞的轉染實驗對于貼壁細胞,一般要求在轉染前一日,用胰酶處理為單細胞懸液。金華細胞高效轉染試劑產品介紹轉染的注意事項:培養基中的物品物品,比如青霉素和鏈霉素,是...
發布時間:2024.07.19上海重慶細胞高效轉染試劑
細胞轉染常用步驟:1.轉染試劑的準備①將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。②震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。2.選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。3.將混合液在室溫放置10―15分鐘。4.吸去培養板中的培養基,用PBS或者無血清培養基清洗一次。5.加入混合液,將細胞放回培養箱中培養一個小時。6.到時后,根據細胞種類決定是否移除混合液,之后加入完全培養基繼續培養24-48小時轉化、轉染、轉導幾...
發布時間:2024.07.19武漢正規細胞高效轉染試劑哪里買
細胞轉染的注意事項:1.細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據不同的細胞類型或應用而異。因轉染試劑對細胞有毒害作用,細胞太少,容易死。一般轉染時,貼壁細胞密度為70%-90%,懸浮細胞密度為2-4×106細胞/ml,確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。因為轉染效率對細胞密度很敏感,所以在不同實驗間保持一個基本的傳代步驟很重要。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產量。細胞的融合度必須要達到90%才能做啟動子的選擇獲得高轉染活性所需選擇的啟動子依賴于選用的細胞系和要表達的蛋白。CMV啟動子在大多數細胞類型中可以獲得高表達活性。同其他啟動子,如SV40和RSV(勞斯肉瘤細菌)相比,在BHK-2...
發布時間:2024.07.18武漢細胞高效轉染試劑直銷價
DNA細胞轉染步驟:1.提前現在細胞鋪板提前現在將細胞種植在24孔板中,以轉染時細胞密度在60%左右為宜。2.轉染過程⑴將0.8μg的DNA用25μl無血清稀釋液稀釋,充分混勻,制成DNA稀釋液。注意:無血清稀釋液建議采用OPTI-MEM、無血清DMEM或1640。⑵將2μlEntransterTM-H4000用25μl無血清稀釋液體稀釋,充分混勻,制成EntransterTM-H4000稀釋液。室溫靜置5分鐘。⑶將EntransterTM-H4000稀釋液分別加入到DNA稀釋液中,充分混勻(可用振蕩器振蕩或用加樣器吹吸10次以上),室溫靜置15分鐘。轉染復合物制備完成。⑷將轉染復合物加入到含...
發布時間:2024.07.18寧波正規細胞高效轉染試劑直銷廠家
細胞轉染實驗注意事項:1.如為貼壁生長細胞,一般要求在轉染前一日,必須應用胰酶處理成單細胞懸液,重新接種于培養皿或瓶,轉染當日的細胞密度以70-90%(貼壁細胞)或2×106-4×106細胞/ml(懸浮細胞)為宜,較好在轉染前4h換一次新鮮培養液。2.用于轉染的質粒DNA必須無蛋白質,無RNA和其他化學物質的污染,OD260/280比值應在1.8以上。3.培養基中的血清在開始準備DNA和陽離子脂質體試劑稀釋液時要使用無血清的培養基,因為血清會影響復合物的形成。其實,只要在DNA-陽離子脂質體復合物形成時不含血清,在轉染過程中是可以使用血清的。脂質體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中。...
發布時間:2024.07.16濟南正規細胞高效轉染試劑廠家批發價
細胞轉染那些事兒:1.選擇傳代次數較低并處于對數生長期的細胞進行轉染。對大多數細胞而言,均需要在轉染當天或前現在鋪板,第二天上午進行轉染,48h后收集細胞進行功能檢測。對于原代細胞,可用促有絲分裂刺激物進行細胞活化。2.對于貼壁細胞,一般要求在轉染前一日,用胰酶處理為單細胞懸液,重新接種于培養皿或瓶,較好在轉染前4小時換一次新鮮培養液。3.支原體污染會嚴重降低細胞轉染的效率,且支原體不會像細菌污染那么明顯,因而轉染前可用環丙沙星處理細胞以除去支原體。4.細胞轉染時需要一定的細胞密度,以70-90%(貼壁細胞)或2×106-4×106細胞/ml(懸浮細胞)為宜。震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,...
發布時間:2024.07.16廈門正規細胞高效轉染試劑廠家直銷
影響轉染試驗的因素:1.轉染試劑跟細胞系不匹配轉染試劑跟細胞系也是講究配合默契的,使用同一種試劑,不同細胞系轉染效率通常不同。但細胞系的選擇通常是根據實驗的需要,因此在轉染實驗前應根據實驗要求和細胞特性選擇適合的轉染試劑。每種轉染試劑都會提供一些已經成功轉染的細胞株列表和文獻,通過這些資料可選擇較適合實驗設計的轉染試劑。當然,較適合的是高效、低毒、方便、廉價的轉染試劑。因為有些細胞系是不穩定的,可能隨著培養時間的改變,培養條件的不同,不同的選擇壓力,可能引起不同的克隆選擇。因此就算是同一個細胞系,在不同條件下轉染能力的差異可能會很大。對于真核生物,轉染就是原核生物中轉化的同義詞。廈門正規細胞高...
發布時間:2024.07.15合肥正規細胞高效轉染試劑廠家供應
細胞轉染方法:1.脂質體轉染法陽離子脂質體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過靜電作用,將DNA分子包裹入內,形成DNA脂復合物,也能被表面帶負電的細胞膜吸附,再通過融合或細胞內吞進入細胞。脂質體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前實驗室較方便的轉染方法之一,其轉染率較高,優于磷酸鈣法。由于脂質體對細胞有一定的毒性,所以轉染時間一般不超過24小時。常用細胞類型:cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等2.電穿孔轉染法電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入胞內,這種方法就是電穿孔。當遇到某些脂質體轉染效率很低或幾乎無法轉入時建議用電穿孔法轉染。一般...
發布時間:2024.07.14北京細胞高效轉染試劑價格
細胞轉染的注意事項:細胞狀態這點非常重要,不要急于求成,一定要讓細胞處于較佳的生長狀態再做。有文獻說傳代不要超過17代。細胞復蘇后的3代左右時細胞狀態較好,不要用傳了很多代的細胞去做,細胞的形態都會發生變化。大多數已建立的細胞系都是非整倍體,原代培養包括了表達不同基因組合的細胞的混合物。細胞培養在實驗室中保存數月和數年后會經歷突變,總染色體重組或基因調控變化等而演化。這會導致和轉染相關的細胞行為的變化。如果隨時間發現這種變化,融化一管新鮮的細胞可能會恢復原先的轉染活性。因此,如果觀察到轉染效率降低,可以試著轉染新鮮培養的細胞以恢復較佳結果?;蛘?,幾種來源于經篩選,轉染效率較高細胞亞系的細胞系現...
發布時間:2024.07.12合肥南昌細胞高效轉染試劑
如何有效提高細胞轉染實驗效率:1.選擇高效的轉染方法不同轉染試劑有不同的轉染方法,但大多大同小異。轉染時應跟據具體轉染試劑推薦的方法,但也要注意,因不同實驗室培養的細胞性質不同,質粒定量差異,操作手法上的差異等,其轉染效果可能不同,應根據實驗室的具體條件來確定較佳轉染條件。2.確保所構建載體的質量。轉染載體的構建(細菌載體,質粒DNA,RNA,PCR產物,寡核苷酸等)也影響轉染結果。細菌載體對特定宿主細胞傳染效率較高,但不同細菌載體有其特定的宿主,有的還要求特定的細胞周期,如逆轉錄細菌需侵染分裂期的宿主細胞,此外還需考慮一些安全問題(如基因污染)。除載體構建外,載體的形態及大小對轉染效率也有不...
發布時間:2024.07.12杭州正規細胞高效轉染試劑廠家供應
細胞轉染,你至少要掌握以下幾點:主要有下面幾種方法::化學法:磷酸鈣法、DEAE-右旋糖苷法、陽離子脂質體法;物理法:電穿孔法、顯微注射法、顆粒傳遞法;細菌介導法:逆轉錄細菌、腺細菌A.陽離子脂質體法:帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。特點:簡單通用,適用性廣,轉染效率高,重復性好,但轉染時需除血清,轉染效率隨細胞類型變化大。由于脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會遠大于懸浮細胞,所以貼壁比懸浮轉染效率要高。懸浮細胞建議使用電穿孔法。B.電穿孔法:利用高壓電脈沖對細胞膜的干擾,使其形成利于核酸進入的微孔。其可降解性對體內應用也具有重要的意義。杭州正規細胞高效轉染試劑廠家供應...
發布時間:2024.07.12重慶正規細胞高效轉染試劑哪里買
細胞轉染實驗注意事項:1.培養基中的物品物品是影響轉染的培養基添加物。這些物品一般對于真核細胞無毒,但陽離子脂質體試劑增加了細胞的通透性,使物品可以進入細胞。這降低了細胞的活性,導致轉染效率降低。這時候可以選擇Entranster轉染試劑,非脂質體試劑,培養基可加物品,避免了細胞染菌。2.設置陽性對照和陰性對照。3.一般在轉染24-48h,靶基因即在細胞內表達。根據不同的實驗目的,24-48h后即可進行靶基因表達的檢測實驗。4.如若建立穩定的細胞系,則可對靶細胞進行篩選,根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物,常用的真核表達基因載體的標志物有潮霉素和新霉素等。重新接種于培養皿或瓶,較...
發布時間:2024.07.11南京細胞高效轉染試劑哪里買
細胞轉染效率低下的幾個大坑:1.試劑過期有時候轉染效率低下,還要考慮會不會存在試劑過期的情況。毛博當年做轉染整整半年,百思不得其解。較后發現,原來是Lipofectamine2000過期了。換了之后,立馬成功。根據我的經驗,盡量使用開封半年內的,因為過了半年后,就算沒有過失效期,但是細胞毒性較大增加,而轉染效率卻較大下降。千萬不要為了省錢,影響實驗進度哈。2.未加血清轉染后未及時加入血清,會導致細胞大量死亡。一般要在轉染后的4-6小時換液且換為有血清的培養基。根據毛博的經驗,其實也可以在原來的無血清培養基里面滴加血清。這個時候,較好不要換液,不要打擾細胞,讓它安安靜靜地休息。但是也不能過早加入...
發布時間:2024.07.11青島細胞高效轉染試劑廠家供應
DNA細胞轉染步驟:1.提前現在細胞鋪板提前現在將細胞種植在24孔板中,以轉染時細胞密度在60%左右為宜。2.轉染過程⑴將0.8μg的DNA用25μl無血清稀釋液稀釋,充分混勻,制成DNA稀釋液。注意:無血清稀釋液建議采用OPTI-MEM、無血清DMEM或1640。⑵將2μlEntransterTM-H4000用25μl無血清稀釋液體稀釋,充分混勻,制成EntransterTM-H4000稀釋液。室溫靜置5分鐘。⑶將EntransterTM-H4000稀釋液分別加入到DNA稀釋液中,充分混勻(可用振蕩器振蕩或用加樣器吹吸10次以上),室溫靜置15分鐘。轉染復合物制備完成。⑷將轉染復合物加入到含...
發布時間:2024.07.11太原正規細胞高效轉染試劑
細胞轉染的原理、操作步驟以及小技巧:脂質體轉染操作步驟:(1)細胞培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。(2)轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)A液:用不含血清培養基稀釋1ug質粒DNA。B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。(3)吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。(4)轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。(5)轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~...
發布時間:2024.07.08溫州唐山細胞高效轉染試劑
細胞轉染那些事兒:1.設置陰性和陽性對照:一般在轉染后24-48h,靶基因即在細胞內表達??梢罁煌膶嶒災康模?4-48h后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。2.轉染后效率的檢測方法:觀察轉染后細胞熒光情況;qPCR驗證;WB檢測敲減或過表達蛋白。3.轉染效率低,可采取以下兩種方法:1)復轉染,即轉染后12-24h再進行轉染,前提是該細胞對脂質體的耐受性較好,轉染后細胞死亡數較少。2)通過藥篩來殺死未轉入成功的細胞,前提是該質粒帶有物品抗性的基因。4.電轉時,不同的細胞需要的電壓是不一樣的,需要做預實驗,摸索較佳條件。對于大多數細胞而言,較佳電壓位于250-1250v/cm。電擊后,應該將DN...
發布時間:2024.07.08天津正規細胞高效轉染試劑廠家批發價
細胞轉染的注意事項:1.細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據不同的細胞類型或應用而異。因轉染試劑對細胞有毒害作用,細胞太少,容易死。一般轉染時,貼壁細胞密度為70%-90%,懸浮細胞密度為2-4×106細胞/ml,確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。因為轉染效率對細胞密度很敏感,所以在不同實驗間保持一個基本的傳代步驟很重要。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產量。細胞的融合度必須要達到90%才能做啟動子的選擇獲得高轉染活性所需選擇的啟動子依賴于選用的細胞系和要表達的蛋白。CMV啟動子在大多數細胞類型中可以獲得高表達活性。同其他啟動子,如SV40和RSV(勞斯肉瘤細菌)相比,在BHK-2...
發布時間:2024.07.08南京正規細胞高效轉染試劑廠家推薦
細胞轉染操作方法:轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種細菌介導的轉染技術。理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。細菌介導的轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優勢。但是,細菌轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有...
發布時間:2024.07.07石家莊正規細胞高效轉染試劑廠家現貨
影響轉染試驗的因素:細胞狀態變化:(1)轉染試劑與細胞不匹配細胞轉染較適合的不是原代細胞,也不是傳代很多次的細胞。這是因為細胞培養在實驗室中保存數月和數年后會經歷突變,總染色體重組或基因調控變化等而演化。這會導致和轉染相關的細胞行為的變化。較適合轉染的細胞是經過幾次傳代后達到對數生長期的細胞,細胞生長旺盛,較容易轉染。(2)把握時機沒錯!轉染也有適當的時機,相比較非分裂細胞——分裂細胞往往要比靜止細胞更易于攝取并表達外源DNA。因此對大多數轉染操作而言,細胞都在轉染當天或前現在種板。同樣重要的是細胞在種板進行轉染時不應處于過度生長的狀態,如細胞數量過多,互相疊加,營養物質耗竭,代謝廢物積聚,轉...
發布時間:2024.07.07南京細胞高效轉染試劑哪家好
細胞轉染效率影響因素:1.細胞密度一般來說,當細胞密度達到60%~80%時進行轉染可以取得較高的轉染效率,過低或過高都會影響轉染效果。2.細胞生長狀態這點非常關鍵,很多時候傳代次數太少或者太多都將導致細胞對轉染試劑敏感度的改變。因此,為了提高轉染效率以及轉染穩定性、降低細胞毒性,應盡量使用適度傳代的細胞系,并在不同次實驗時保持細胞傳代次數的一致性。3.細胞種類不同細胞種類的細胞在做轉染時所需要的轉染體系是不同的,不能一種體系用在所有類型細胞的轉染實驗。其可降解性對體內應用也具有重要的意義。南京細胞高效轉染試劑哪家好細胞轉染常用步驟:1.轉染試劑的準備①將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒...
發布時間:2024.07.07蕪湖細胞高效轉染試劑哪家好
細胞轉染的常用方法:細菌轉染:原理:對于用脂質體不能實現轉染的細胞,可以采用細菌轉染??捎糜诘鞍踪|過表達或克制,是臨床研究中較常用的方法。它通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中,可用于難轉染細胞、原代細胞的穩定性轉染。實驗步驟:通過基因克隆生成重組細菌→采用非細菌法轉染包裝細胞系,擴增并分離得到重組細菌顆?!兓⒌味毦骸D導目的細胞(含有細菌特異性的受體)→去除培養物中的細菌,并加入新鮮培養基→分析細胞瞬時基因表達或沉默情況。瞬時轉染的細胞中,外源基因得以表達但它們并不會整合到細胞的基因組中。蕪湖細胞高效轉染試劑哪家好細胞轉染的注意事項:1.細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據不同...
發布時間:2024.07.07濟南細胞高效轉染試劑直銷價
細胞轉染為什么不能加血清:不同的細胞及轉染試劑要求轉染的條件是不同的。較好是在靠前次實驗前做一個預實驗,比如:HeLa,293,CHO,COS7,MCF-7,HepG2等細胞,是否加血清,對不同的細胞是有不同的影響的,有些細胞是可以有血清的,有些加血清就會受影響。轉染后在6小時左右較好換液且換為有血清的培養基,其一因為普通轉染試劑對細胞的毒性作用大,其二可降低因血清的缺乏引起的細胞的死亡。轉染時不加血清是防止血清的干擾作用,轉染后可適時加入。加入過早會引起未轉染細胞的優勢生長,過晚會引起較多細胞死亡。可實時觀察1/5細胞變圓的時候加入血清一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染(很長轉染)。濟南細胞高效...
發布時間:2024.07.06徐州正規細胞高效轉染試劑供應商
瞬時轉染和轉染效率的監測:基因的瞬時表達在24-72小時內就結束了。這種快速的瞬時表達非常適用于驗證質粒表達和監測轉染步驟的效率??梢允褂脠蟾婊騺泶_定優化條件,其表達蛋白易檢測,在目的細胞中不含此蛋白或水平很低。常用的報告基因包括氯霉素乙酰轉移酶(CAT),綠色熒光蛋白(GFP),熒光素酶(Lux或Luc)以及b-半乳糖苷酶(b-gal)。可以使用簡單的非同位素方法檢測b-gal的表達以測定轉染效率和活性。pCMVSPORT-bgal質粒包含CMV啟動子調控下的LacZ基因,轉染入真核細胞內后可以直接表達bgal。結合簡單的檢測步驟,可以做為監測轉染條件的一種方便靈敏的方法。到時后,根據細胞...
發布時間:2024.07.04深圳細胞高效轉染試劑進貨價
細胞電轉染實驗的幾點建議:1.電場強度要合適合適的電場強度對于電轉染實驗非常重要,電場強度不能過高,過高會增加細胞的死亡率;也不能過低,過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細胞系具有不同的較佳場強值,實驗前應測定所轉染細胞系的較佳電場強度。2.細胞狀態要好用于電轉的細胞一般選取處于對數生長期的細胞(15代以內,傳代后2d)。因為處于對數生長期的細胞分裂旺盛,表面結構致密比穩定期的細胞差,電轉后,細胞膜的恢復能力強,而且處于有絲分裂期的細胞更容易接受外源DNA瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA。深圳細胞高效轉染試劑進貨價DNA細胞轉染步驟:1.提前現在細胞...
發布時間:2024.07.03重慶細胞高效轉染試劑報價
細胞轉染效率低下的幾個大坑:1.準備不足做脂質體轉染的時候,在開展正式實驗前要多做預試驗,優化轉染條件。優化轉染條件包括:脂質體的用量、DNA密度、細胞密度、脂質體和DNA混合孵育時間等等。2.電壓過大做電轉的時候,如果電壓太大,往往會發生細胞大量死亡的情況。不同的細胞,需要的電壓是不一樣的。這就要求我們多做預實驗,多摸索條件。對于大多數細胞來說,其較佳電壓位于250-1250v/cm。另外,就是進行轉染的細胞應該處于對數生長期。處于對數生長期的細胞的抗損傷能力是較強的。細胞濃度應該處于5x106到1x107/mL之間。每次轉染的質粒應該控制在4-6μg,如果﹥10μg,轉染效率也較大降低。電...
發布時間:2024.07.03北京正規細胞高效轉染試劑廠家
細胞轉染簡介:轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種細菌介導的轉染技術。對于貼壁細胞,一般要求在轉染前一日,用胰酶處理為單細胞懸液。北京正規細胞高效轉染試劑廠家細胞轉染效率低下的幾個大坑:1.不注意細節在轉染之前更換一次37℃預溫的培養基,可提高轉染效率。...
發布時間:2024.07.02開封細胞高效轉染試劑單價
細胞轉染的注意事項:1.細胞鋪板密度用于轉染的較佳細胞密度根據不同的細胞類型或應用而異。因轉染試劑對細胞有毒害作用,細胞太少,容易死。一般轉染時,貼壁細胞密度為70%-90%,懸浮細胞密度為2-4×106細胞/ml,確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。因為轉染效率對細胞密度很敏感,所以在不同實驗間保持一個基本的傳代步驟很重要。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產量。細胞的融合度必須要達到90%才能做啟動子的選擇獲得高轉染活性所需選擇的啟動子依賴于選用的細胞系和要表達的蛋白。CMV啟動子在大多數細胞類型中可以獲得高表達活性。同其他啟動子,如SV40和RSV(勞斯肉瘤細菌)相比,在BHK-2...
發布時間:2024.07.01成都細胞高效轉染試劑價格
細胞轉染操作方法:轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種細菌介導的轉染技術。理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。細菌介導的轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優勢。但是,細菌轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有...
發布時間:2024.06.30