合成培養基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養物質組成的培養基。根據微生物對營養要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質量可做到穩定一致。此培養基可用來檢測某種營養物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養液均屬合成培養基。合成培養基的成本較高,其價格相當于同類天然培養基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養基,只適用于自養菌的培養,如培養亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養基。有些培養基大部分成分為已知化學結構的營養物質,其中的個別或少數成分為未明化學成分的必須營養物,成為半合成培養基,如百日咳菌苗生產用的水解酪素培養基。固體培養基則通過向液態培養基中加入凝膠劑來制成,以便在培養過程中提供可視化定位細胞的單元。富馬酸鈉溶液
培養基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養基pH發生變化,若不對培養基pH條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。因此,為了維持培養基pH的相對恒定,通常在培養基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養基pH不會過度降低;如果培養基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養基pH也不會過度升高。Dubos油酸瓊脂基礎培養基的pH值需要根據不同微生物的生長適應范圍進行調節。
半組合培養基:指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如,馬鈴薯蔗糖培養基。固體培養基:1.液體培養基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。2.固體培養基:一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。3.半固體培養基:指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。4.脫水培養基:又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。
培養細胞時應使用5%還是10%CO2,或者根本沒有影響?一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統,而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養時應使用10% CO2;當培養基中NaHCO3 為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養細胞。NaHCO3的作用:培養基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統,并采用開放培養,使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶,再通過穩定調節溫箱中CO2濃度(5%) ,與培養基中的NaHCO3處于平衡狀態,從而調節培養基的PH值。NEAA:非必須氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養基不同,NEAA 也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養基為營養瓊脂平板培養基。
還有一些鑒別性培養基,是利用細菌特有的各種酶系統,能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養基。用于細菌生化特性試驗的培養基特點是在無糖的基礎培養基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養基為生化反應鑒別培養基。根據用量又可分為常量生化培養基和微量生化培養基。值得注意的是生化試驗培養基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。培養基是細胞和微生物生長所需的基本營養物質和環境條件。二硫蘇糖醇溶液(DTT)
常見的培養基有LB培養基,YPD培養基,M9培養基和DMEM培養基等。富馬酸鈉溶液
細胞培養液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養、保存、運輸活組織及細胞的液體,實質為人工模擬體內生長的營養環境,使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。由于其成分數量明確并可通過調節某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學改變,被廣泛應用于細胞生物學科的研究。細胞培養液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子、生長因子等,這些成分必須通過嚴格挑選,嚴格測試后方可使用,所用的水必須達到2級試驗用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必須清潔無污并進行高壓滅菌或干烤去熱源處理。富馬酸鈉溶液
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