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企業(yè)商機(jī)
探針基本參數(shù)
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探針企業(yè)商機(jī)

探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),便于標(biāo)記。特點(diǎn)是比活性高,可達(dá)9000Ci/mmol;發(fā)射的β射線能量高。用它標(biāo)記的探針自顯影時(shí)間短,靈敏度高。32P的半壽期短,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法。酶標(biāo)方法與免疫測(cè)定ELISA方法相似,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,事實(shí)上被標(biāo)記的抗體也稱為探針,現(xiàn)有許多商品是生物素、地高辛標(biāo)記的。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。嘉定區(qū)特制探針生產(chǎn)廠家

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***臺(tái)電子探針是法國(guó)制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯(lián)制成了X射線微區(qū)分析儀,以后英、美等國(guó)陸續(xù)生產(chǎn)。***臺(tái)掃描電子探針儀是美國(guó)于1960年制成,不僅能對(duì)試樣作點(diǎn)或微區(qū)分析,而且能對(duì)樣品表面微區(qū)進(jìn)行掃描。原子序數(shù)12至22的元素要在真空下進(jìn)行成分測(cè)定,原子序數(shù)12以內(nèi)的元素需要增添一些特殊設(shè)備才能分析。原子序數(shù)50以上的元素用L系X射線光譜進(jìn)行分析,原子序數(shù)50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進(jìn)行分析。 [2]嘉定區(qū)特制探針?shù)N售廠家把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來(lái)。

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值得一提的是,通過(guò)改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的轉(zhuǎn)錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉(zhuǎn)錄RNA。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補(bǔ)),反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,還可用于檢測(cè)mRNA的表達(dá)水平。在這種情況下,因?yàn)樘结樅桶行蛄芯鶠閱捂湥噪s交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。RNA探針除可用于檢測(cè)DNA和mRNA外,還有一個(gè)重要用途,在研究基因表達(dá)時(shí),常常需要觀察該基因的轉(zhuǎn)錄狀況。

用此探針在DNA文庫(kù)中篩選,陽(yáng)性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列,而原核則沒(méi)有。因此,真核基因組DNA探針用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針(包括cDNA探針)的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn):①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中,可以無(wú)限繁殖,取之不盡,制備方法簡(jiǎn)便。②DNA探針不易降解(相對(duì)RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移,隨機(jī)引物法,PCR標(biāo)記法等,能用于同位素和非同位素標(biāo)記。探針卡應(yīng)用在IC尚未封裝前,針對(duì)裸晶系以探針做功能測(cè)試,篩選出不良品、再進(jìn)行之后的封裝工程。

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利用電子探針?lè)治龇椒梢蕴街牧蠘悠返幕瘜W(xué)組成以及各元素的重量百分?jǐn)?shù)。分析前要根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康闹苽錁悠罚瑯悠繁砻嬉鍧崱S貌ㄗV儀分析樣品時(shí)要求樣品平整,否則會(huì)降低測(cè)得的X射線強(qiáng)度。定性分析1 點(diǎn)分析用于測(cè)定樣品上某個(gè)指定點(diǎn)的化學(xué)成分。下圖是用能譜儀得到的某鋼定點(diǎn)分析結(jié)果。能譜儀中的多道分析器可使樣品中所有元素的特征X射線信號(hào)同時(shí)檢測(cè)和顯示。不像波譜儀那樣要做全部譜掃描,甚至還要更換分光晶體。2 線分析用于測(cè)定某種元素沿給定直線分布的情況。方法是將X射線譜儀(波譜儀或能譜儀)固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線信號(hào)(波長(zhǎng)或能量)的位置上,把電子束沿著指定的方向做直線軌跡掃描,便可得到該元素沿直線特征X射線強(qiáng)度的變化,從而反映了該元素沿直線的濃度分布情況。改變譜儀的位置,便可得到另一元素的X射線強(qiáng)度分布。下圖為50CrNiMo鋼中夾雜Al2O3的線分析像。可見(jiàn),在Al2O3夾雜存在的地方,Al的X射線峰較強(qiáng)。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射、能作電子熒光觀察等。嘉定區(qū)特制探針生產(chǎn)廠家

掃描電子探針儀是美國(guó)于1960年制成,不僅能對(duì)試樣作點(diǎn)或微區(qū)分析,而且能對(duì)樣品表面微區(qū)進(jìn)行掃描。嘉定區(qū)特制探針生產(chǎn)廠家

進(jìn)行分子突變需要大量的探針拷貝,后者一般是通過(guò)分子克隆(molecular cloning)獲得的。克隆是指用無(wú)性繁殖方法獲得同一個(gè)體、細(xì)胞或分子的大量復(fù)制品。當(dāng)制備基因組DNA探針前,應(yīng)先制備基因組文庫(kù),即把基因組DNA打斷,或用限制性酶作不完全水解,得到許多大小不等的隨機(jī)片段,將這些片段體外重組到運(yùn)載體(噬菌體、質(zhì)粒等)中去,再將后者轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞如大腸肝菌,這時(shí)在固體培養(yǎng)基上可以得到許多攜帶有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通過(guò)原位雜交,從中可篩出含有目的基因片段的克隆,然后通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增,制備出大量的探針。嘉定區(qū)特制探針生產(chǎn)廠家

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