電子探針又稱(chēng)微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。其原理是利用聚焦的高能電子束轟擊固體表面,使被轟擊的元素激發(fā)出特征X射線,按其波長(zhǎng)及強(qiáng)度對(duì)固體表面微區(qū)進(jìn)行定性及定量化學(xué)分析。主要用來(lái)分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆粒或微小區(qū)域,**小范圍直徑為1μm左右。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。***感量可達(dá)10-14至10-15g。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合裝置,可在觀察微區(qū)形貌的同時(shí)逐點(diǎn)分析試樣的化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)。廣泛應(yīng)用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門(mén)。如圖《電子探針示意圖》所示。(1)電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。上海優(yōu)勢(shì)探針推薦貨源
探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),便于標(biāo)記。特點(diǎn)是比活性高,可達(dá)9000Ci/mmol;發(fā)射的β射線能量高。用它標(biāo)記的探針自顯影時(shí)間短,靈敏度高。32P的半壽期短,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法。酶標(biāo)方法與免疫測(cè)定ELISA方法相似,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,事實(shí)上被標(biāo)記的抗體也稱(chēng)為探針,現(xiàn)有許多商品是生物素、地高辛標(biāo)記的。靜安區(qū)特制探針品牌不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App、及各類(lèi)廣告插件App,使用正規(guī)合法App是保護(hù)個(gè)人信息;
為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交,有必要對(duì)探針加以標(biāo)記,以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探針DNA雙鏈上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,切去帶有5’磷酸的核苷酸;同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性,使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口,DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動(dòng),同時(shí)DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)記的核苷酸所取代。
電子探針儀鏡筒部分的構(gòu)造大體上和掃描電子顯微鏡相同,只是在檢測(cè)器部分使用的是X射線譜儀、專(zhuān)門(mén)用來(lái)檢測(cè)X射線的特征波長(zhǎng)或特征能量,以此來(lái)對(duì)微區(qū)的化學(xué)成分進(jìn)行分析。因此,除專(zhuān)門(mén)的電子探針儀外,有相當(dāng)一部分電子探針儀是作為附件安裝在掃描電鏡或透射電鏡鏡筒上,以滿(mǎn)足微區(qū)組織形貌、晶體結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分三位一體同位分析的需要 [1]。用波長(zhǎng)色散譜儀(或能量色散譜儀)和檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng),測(cè)量特征X射線的波長(zhǎng)(或能量)和強(qiáng)度,即可鑒別元素的種類(lèi)和濃度。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機(jī)系統(tǒng)以外,還主要包括分光系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)等部分。
X射線譜儀能譜儀電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,不同的元素有不同的X射線特征波長(zhǎng)和能量。通過(guò)鑒別其特征波長(zhǎng)或特征能量就可以確定所分析的元素。利用特征波長(zhǎng)來(lái)確定元素的儀器叫做波長(zhǎng)色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱(chēng)為能量色散譜儀(能譜儀)。1、波譜儀波譜儀的關(guān)鍵在于怎樣實(shí)現(xiàn)將未知的特征譜線與已知元素Z聯(lián)系起來(lái)?為此設(shè)想有一種晶面間距為d的特定晶體(我們稱(chēng)為分光晶體),當(dāng)不同特征波長(zhǎng)λ的X射線照射其上時(shí),如果滿(mǎn)足布拉格條件(2dsinθ=λ)將產(chǎn)生衍射。顯然,對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ*有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿(mǎn)足衍射條件。電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,不同的元素有不同的X射線特征波長(zhǎng)和能量。靜安區(qū)質(zhì)量探針按需定制
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電子探針儀(圖1)主要包括:探針形成系統(tǒng) (電子槍、加速和聚焦部件等)、X射線信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)和顯示、記錄系統(tǒng)、樣品室、高壓電源和掃描系統(tǒng)以及真空系統(tǒng)。電子探針的**早應(yīng)用領(lǐng)域是金屬學(xué)。對(duì)合金中各組成相、夾雜物等可作定性和定量分析,直觀而方便,還能較準(zhǔn)確地測(cè)定元素的擴(kuò)散和偏析情況。此外,它還可用于研究金屬材料的氧化和腐蝕問(wèn)題,測(cè)定薄膜、滲層或鍍層的厚度和成分等,是機(jī)械構(gòu)件失效分析、生產(chǎn)工藝的選擇、特殊用材的剖析等的重要手段。圖2為鎂合金中稀土氧化物在晶界析出的電子探針?lè)治稣掌I虾?yōu)勢(shì)探針推薦貨源
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