L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需要。高糖 DMEM 適合生長快、粘附低的細胞,如腫瘤細胞的培養 。四川細胞培養基批發廠
Grace’s昆蟲培養基是由Grace改良的Wyatt培養基,該培養基與昆蟲血淋巴的化學成分更為相近,Grace使用這種培養基成功建立了***個昆蟲連續細胞系。Grace’s昆蟲培養基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細胞的培養,適當補充添加劑后,Grace’s昆蟲培養基可用于培養各種昆蟲細胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲的細胞。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。Grace’s補充昆蟲細胞培養基**初設計用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)的細胞生長。Grace’s補充昆蟲培養基目前***用于草地貪夜蛾細胞Sf9和Sf21的生長。Sf9和Sf21細胞常規使用于桿狀病毒表達載體系統(BEVS)表達重組蛋白。本產品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。Grace’s補充昆蟲培養基含有Grace’s昆蟲細胞培養基(PM152011)中不常見的水解乳蛋白和酵母粉,此產品需搭配血清或無血清添加物使用。 江蘇實驗細胞培養基源頭廠家M199有兩種平衡鹽成分,Earle’s鹽成分常用于CO2環境,Hank’s鹽成分用于非CO2的環境。
III)細胞系的大規模連續培養。該培養基主要用于培養和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養基基礎也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及酸鈉。DMEM培養基*初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的DMEM改良培養基。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染*常用的,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷。 Ham’s F-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養基營養更為豐富,使用更為廣。
在細胞培養實踐中,選擇合適的 DMEM 培養基至關重要。對于生長較快、粘附性低的細胞,如某些腫瘤細胞和雜交瘤細胞,高糖型 DMEM 培養基是理想之選,其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細胞對能量的高需求,促進細胞快速生長。而對于一些原代細胞,因其對培養環境更為敏感,可能需要低糖型 DMEM 培養基,并根據細胞來源和特性添加特定的生長因子、營養補充劑等,定制專屬培養方案,為原代細胞提供**適宜的生長條件,提高原代細胞培養的成功率。McCoy’s 5A培養基還用于組織活檢培養、細胞建系,以及一些淋巴細胞和較難培養的細胞的培養。福建昆蟲細胞培養基
McCoy’s 5A培養基是Thomas McCoy等人在1959年設計的培養基,初專門用于Novikoff Hepatoma細胞的培養。四川細胞培養基批發廠
DMEM 培養基具備多種實用配方,以滿足不同細胞的生長需求。其中,高糖型(葡萄糖濃度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖濃度 1000mg/L)為常見。高糖型 DMEM 培養基猶如為代謝旺盛的細胞量身定制,為其提供充足的能量來源,促使細胞快速生長、增殖,尤其適用于像腫瘤細胞這類生長迅猛、對能量需求高的細胞。而低糖型 DMEM 培養基則更契合代謝較為緩慢的細胞,為它們營造溫和穩定的生長環境,保障細胞正常代謝與功能維持,在細胞培養過程中,科研人員可依據細胞特性靈活選用合適配方。四川細胞培養基批發廠
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