無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。專為原代細胞和神經細胞優化,DMEM/F12助力復雜研究突破。重慶醫療細胞培養基供應商家
在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。江西正規細胞培養基供應商家Dulbecco’s 改良培養基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。
1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。
Grace’s昆蟲培養基是由Grace改良的Wyatt培養基,該培養基與昆蟲血淋巴的化學成分更為相近,Grace使用這種培養基成功建立了***個昆蟲連續細胞系。Grace’s昆蟲培養基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細胞的培養,適當補充添加劑后,Grace’s昆蟲培養基可用于培養各種昆蟲細胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲的細胞。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。Grace’s補充昆蟲細胞培養基**初設計用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)的細胞生長。Grace’s補充昆蟲培養基目前***用于草地貪夜蛾細胞Sf9和Sf21的生長。Sf9和Sf21細胞常規使用于桿狀病毒表達載體系統(BEVS)表達重組蛋白。本產品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。Grace’s補充昆蟲培養基含有Grace’s昆蟲細胞培養基(PM152011)中不常見的水解乳蛋白和酵母粉,此產品需搭配血清或無血清添加物使用。 Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養,低血清條件下細胞的克隆化培養,及動物的原代細胞培養。
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已應用于各種正常細胞培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞,是培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用的培養基之一。實驗細胞培養基
Dulbecco’s 改良培養基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現已廣應用于各種細胞的培養。重慶醫療細胞培養基供應商家
細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。重慶醫療細胞培養基供應商家
深圳市華晨陽科技有限公司是一家致力于核酸檢測、分子診斷、醫學檢驗、病毒檢測等產品研發、生產、銷售于一體的國家高新技術企業。公司擁有二十多項專利,部分專利已經轉化應用于市場。產品主要應用于基因檢測、醫療機構、生物制藥、大型甲等醫院、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、疾控機構、刑偵法醫鑒定等。近年來,公司不斷加大自主研發投入,積極引進人才和技術,并與國內外多家科研機構、醫學檢驗所以及三甲醫院、基因檢測公司、疾病預防控制中心等科研機構有著緊密合作,促進人類健康產業大發展。