試劑盒:JC-1是一種陽離子脂質(zhì)熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級,有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性。原理:JC-1染料在正常細(xì)胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),形成多聚體,發(fā)紅色熒光;而在凋亡細(xì)胞內(nèi),由于線粒體膜電位的破壞,不能聚集到線粒體內(nèi),以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時以單體的形式存在,高濃度時以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細(xì)胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,JC-1可透過正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi)。取材必須新鮮,這一點對于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷
粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片江西口碑好的糖原染色試劑盒遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意~
PAS染色的臨床意義①幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞或Reed-Sternberg細(xì)胞,前者呈強(qiáng)陽性反應(yīng),后者呈弱陽性或陰性反應(yīng)。②幫助鑒別戈謝細(xì)胞和尼曼-匹克細(xì)胞,前者呈強(qiáng)陽性反應(yīng),后者呈弱陽性反應(yīng),且空泡中心為陰性反應(yīng)。③幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,后者呈強(qiáng)陽性反應(yīng),陽性反應(yīng)物質(zhì)為紅色細(xì)顆粒狀或粗顆粒狀,有時呈紅色塊狀。白細(xì)胞系統(tǒng):急性淋巴細(xì)胞白血病時白血病性原始淋巴細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)為紅色粗顆粒狀或紅色塊狀,底色不紅;急性粒細(xì)胞白血病時,白血病性原始粒細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)呈均勻分布的紅色細(xì)顆粒狀或呈均勻紅色;急性單核細(xì)胞白血病時,白血病性原始單核細(xì)胞的陽性反應(yīng)物質(zhì)呈紅色細(xì)顆粒狀,彌散分布,有時在胞漿的邊緣處顆粒較粗大。糖原染色應(yīng)用的范圍比較廣。
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時*個別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷
切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。浙江如何使用糖原染色試劑盒廠家直銷
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...