外泌體(Exosome)是細胞主動分泌的囊泡樣小體,大小均一,直徑30-200nm,密度1.10-1.18g/ml,來源普遍,幾乎所有細胞都可分泌,在血液,尿液,唾液,腦脊液,腹水,乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發現于培養的綿羊紅細胞上清液中。1996年,研究者發現外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應,開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫學獎解答了細胞如何組織其內部較重要的運輸系統之一——囊泡傳輸系統的奧秘。外泌體(Exosome)發現于1986年,是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結構小體。廣州外泌體提取試劑哪里買
大量關于一些病癥相關巨噬細胞的研究表明,一些病癥相關巨噬細胞通過與一些病癥細胞進行細胞間通訊,與一些病癥進展和轉移相關,然而對TAM與一些病癥細胞之間通信的研究限制于可溶性因子,例如促炎細胞因子,其中包括趨化因子、炎癥因子和生長因子等。較近的研究證據表明,外泌體是一些病癥微環境中不同細胞類型之間的重要通訊媒介。外泌體將信息從一個細胞傳遞到另一個細胞并重編程受體細胞。目前大部分研究都集中在一些病癥細胞分泌的外泌體,關于TAM衍生的外泌體及其對治病細胞的影響知之甚少。TAM具有兩種相反的表型:M1亞型巨噬細胞具有抗一些病癥作用,M2型巨噬細胞具有致瘤作用活性。TAM的表型由特定的一些病癥來源的趨化因子和外泌體調節。較近的一項研究表明,一些病癥來源的外泌體miRNA調節一些病癥促進M2巨噬細胞的極化。然而,TAM衍生的外泌體對一些病癥進展和轉移的調節尚未明確定義。目前,TAM的外泌體概況仍然大部分未知,并且TAM衍生的外泌體對于一些病癥進展在功能上是否必需還未確定。徐州外泌體提取試劑平均價格外泌體的分離純化一直是科研工作者關注的問題,獲得高純度的外泌體對后續的研究至關重要。
外泌體與免疫系統:不同的細胞來源的外泌體,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發生的發展過程中起作用。體外培養心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關的代謝適應有關;體外培養的間充質干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用。
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀,早先應用于從血清等樣本中收集病毒,現在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層,是一種區帶分離法。
為了分離外泌體,研究人員用兩個這樣的單元串聯構建了一個裝置。首先,使用聲波從血液樣品中除去細胞和血小板。一旦細胞和血小板被去除,樣品進入第二個微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細胞外囊泡分開。這項工作的通訊作者之一,麻省理工學院材料科學與工程系科學家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短。這是一個很大的優勢。”使用該設備,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘。“這種新技術可以解決當前外泌體分離技術的缺點,如周期長,一致性差,產量低,污染以及完整性受損等。我們想要把提取高質量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內獲得所需樣品一樣簡單。”研究人員們說。在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。徐州外泌體提取試劑平均價格
外泌體的提取分離:試劑盒提取。廣州外泌體提取試劑哪里買
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態、雙層膜結構,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養基等生物體液中。包括瘤細胞在內幾乎所有類型的細胞(免疫細胞、神經細胞、干細胞),都可以產生并釋放exosome。Exosome內含有與細胞來源相關的蛋白質rRNA和microRNA,Exosome可通過細胞膜受體直接受體細胞,也可運輸蛋白質、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至細胞器進入受體細胞,參與細胞間通訊。Exosome在免疫應答、炎癥反應、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發揮關鍵作用,不同細胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標記物,也能作為靶向藥物的載體進行疾病廣州外泌體提取試劑哪里買
外泌體相關miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達,目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合,從而阻滯整個生物通路。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環游離miRNA的表達,與75例健康者相比,發現了兩種高表達的miRNA(miR-25和miR-223)。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個mi...