簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養皿的包被,特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養;也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環境中生長。質量標準:1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養皿后培養PC-12細胞,貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。結果無鼠尾膠原時,前庭毛細胞懸浮于外液,不宜封接。北京鼠尾膠原
具體實施方式實施例1止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為0.2%0.2%。余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養小板,-40°C預凍池,再轉入_80°C超低溫冰箱急凍4h,再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥10h,即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌,干燥保存。凍干的材料可直接用于各種傷口的止血。實施例2止血材料的制備1、選擇能與鼠尾膠原蛋白聯合發揮作用的聚乙烯醇、殼聚糖作為輔料。各個材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5%2%1%,余量為水。2、將混合材料用無菌水溶解后澆入培養板,-20°C預凍,再轉入_80°C超低溫冰箱急凍8h,再轉入真空冷凍干燥機中將復合材料在-4°C下冷凍干燥30h,即可以得到復合型凍干止血材料。Co60輻射滅菌,干燥保存。太原正規鼠尾膠原利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。
鼠尾膠原蛋白等實驗技術應用:干細胞、血管內皮細胞等多種「難伺候」的細胞,以及一些組織在體外培養時,需要在模擬體內環境的細胞外基質中生長,膠原蛋白和纖粘蛋白正是細胞外基質的主要組成部分,富含1型膠原蛋白大鼠尾部也成了實驗室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的。它可以用于監測小鼠血液成分的變化,確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血,實驗用鼠尾尖取血的取血量較小,但取血之后,小鼠還能繼續下一步建模或者實驗,完全沒有性命之憂。
膠原蛋白按其應用可以分為食品級、一般級、醫藥級。食用膠原一般來源于動物的真皮、肌腱和骨膠原.其中皮膠原是主要的食用膠原。食用級膠原通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。膠原的獨特品質.使得它在許多食品中用作功能物質和營養成分,具有其它替代材料無可比擬的優越性:①膠原大分子的螺旋結構和存在結晶區.使其具有一定的熱穩定性;②膠原天然的緊密的纖維結構,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發現具有這品質。制備鼠尾膠原:取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘。
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4)在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,混勻,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6)使用時,無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結構。昆明正規鼠尾膠原單價
將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉移到培養箱內。北京鼠尾膠原
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養皿中一定程度上模擬身體內部的生長環境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網站——知網,輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。蘇州君欣生物科技有限公司北京鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...