DNA和RNA的鑒別染色：利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定，非固定細胞核酸，或作溶酶體的一種標記。觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體。雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果，但該方法已被許多實驗室普遍采用。RNA是核糖核酸，DNA是脫氧核酸。區別：溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚來沉淀RNA。RNA定量方法與DNA定量相似。廈門RNA提取試劑直銷廠家

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將50～300mg昆蟲組織放入10～15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5～20秒。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織，硯磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。室溫12000rmp離心3～5分鐘，兩相間將有約5-10毫米厚的細胞破碎物。將上清液(約0.6mL)轉移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，下層有機相和中間層含有DNA、蛋白質和其他雜質，避免觸及或吸取。較好留下100μL上清液不取。加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。南京正規RNA提取試劑廠家RNA 提取關鍵點病菌 RNA 在提取后也仍然具有傳染性。

RNA提取：預備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。

拭子RNA提取試劑的選擇？拭子樣本的量與提取的核酸量成正比，如果要提高核酸得率，也可通過增加樣本量來實現。一般先取一根拭子的涮洗液樣本，然后進行提取，如結果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結果，應及時考慮更換試劑盒。目前國內常用的拭子核酸提取試劑有Q、Biog等。根據我們的經驗，Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率（一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次）在0.5-3.5ug。同樣處理的口咽拭子，Biog試劑盒的提取得率在1-4ug，基本上都能滿足下游PCR相關實驗的要求優化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。

動物細胞RNA提取：1、懸浮細胞：可直接離心后棄掉培養基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側，從而限制沉淀內部的細胞與裂解液的接觸，從而導致細胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞：棄掉培養基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養皿，把細胞吹下來，轉移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進行提取。3、貼壁細胞：需要先用胰酶消化，然后收集到無RNA酶的EP管中，離心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以適量PBS重懸后繼續進行提取步驟。RNA提取試劑注意事項：耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶。北京正規RNA提取試劑供應商

異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質。廈門RNA提取試劑直銷廠家

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、得率過低：提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底；應當使用適當質量的組織或細胞進行提取，樣本前處理一定要做好，裂解應充分。2、基因組殘留：Trizol法提取時，分層后吸取上清時吸到中間層會帶來嚴重的基因組污染；分層吸取時應當格外小心，不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取，可選擇含有DNaseI的試劑盒進行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進行消化，可極大限度的降低DNA殘留。廈門RNA提取試劑直銷廠家