對RNA的科學研究,首先要從植物或者動物等組織中提取出合格的RNA。在實際RNA提取中,有幾個提取原則:1、保證RNA一級結構的完整性;2、提取的RNA樣品中不應存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子;3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到較低程度;4、排除其它核酸分子(DNA)的污染。常用RNA提取方法有:1TRIzol法;2TRIzol+過柱法;3CTAB+過柱法;4試劑盒法。RNA提取試劑盒BiomarkerPlantTotalRNAIsolationKit(Polysaccharides&Polyphenolics–rich),能從植物組織,特別是富含多糖多酚或淀粉的植物組織(如成熟水稻葉片,棉花葉片,擬南芥種子,香蕉,馬鈴薯塊莖,蘋果,西瓜果肉,獼猴桃,梨,月季等)中快速提取總RNA,同時可以處理大量不同樣品。快速程序在25-40分鐘內提供高質量的總RNA。南京正規RNA提取試劑產品介紹
BIOG血液RNA快速提取試劑盒:BIOG血液RNA快速提取試劑盒是我公司研發團隊在綜合比較了國外同類較好產品的基礎上反復研制優化而成,專門用于血液RNA的快速提取純化。本試劑盒采用獨特的裂解液配方,可直接從新鮮、冷凍或陳舊的全血中提取高質量的RNA,操作簡便快速,只需15分鐘即可完成血液RNA提取。RNA提取得率較高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA。BIOG血液RNA快速提取試劑盒采用了較新的較好離子膜,裂解液和洗脫液經過多次優化,有效地去除了蛋白、色素、脂類等雜質污染,特別適用于血液包括細菌、病菌等傳染的分子檢測。長沙RNA提取試劑推薦廠家RNA提取試劑注意事項:TRIReagent含有毒物質苯酚,避免接觸皮膚或吸入。
RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區別:紫外吸收:核酸的λm=260nm,堿基展開程度越大,紫外吸收就越厲害。當A=1時,DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280還可來表示核酸的純度。沉降速度:對于拓撲異構體(核苷酸數目相同的核酸),其沉降速度從達到小依次為:RNA;超螺旋DNA>解鏈環狀DNA;松弛環狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA,較下面是RNA。電泳:核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法。DNA分子量測定較直接的方法:用適當濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數,根據核苷酸的平均分子量就可計算出DNA的分子量。
拭子RNA提取試劑的選擇?1、產品價格。價格也是選購產品的重要考量因素。對于絕大多數實驗如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構建等,國產試劑盒都能滿足質量要求。與國外有名品牌相比,國產試劑盒的價格較為便宜,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高。因而,對于以上實驗建議選用國產試劑盒。一些經費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數實驗,特別是下游需要PCR擴增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上,國內試劑盒與國外品牌差別不大,而在價格方面,國產試劑盒具有比較明顯的優勢。如果經費充足,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經費不多或下游主要做PCR或分子雜交等實驗,可考慮選擇性價比較高的國產品牌。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學后實驗。
RNA提取試劑注意事項:1、需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。2、所有離心管,泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存。RNA提取試劑注意事項:溶液需用DEPC水配制。深圳RNA提取試劑哪家便宜
若比值較低,說明有殘余蛋白質存在;比值太高,則提示RNA有降解。南京正規RNA提取試劑產品介紹
RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內,多數的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質,但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應的病菌傳染,傳染的程度及病菌是否仍在大量復制。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。專門的高鹽緩沖系統允許RNA物質基團結合到旋轉柱的玻璃纖維基質上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。南京正規RNA提取試劑產品介紹
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...