外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實現分離大分子。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外，可以將不同的洗脫溶液應用于該方法。與離心方法相比，色譜分離已被證明具有更多優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會改變囊泡的結構。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術。不過，該方法耗時較長，不適合大量樣本處理外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。徐州正規外泌體提取試劑哪家好

外泌體與免疫系統：不同的細胞來源的外泌體，包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響，刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病：外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發生的發展過程中起作用。體外培養心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關的代謝適應有關；體外培養的間充質干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用。這些發現表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA，蛋白等物質改變受體細胞的代謝狀態。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創診斷。濟南正規外泌體提取試劑供應商有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。

外泌體相關miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達，目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合，從而阻滯整個生物通路。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環游離miRNA的表達，與75例健康者相比，發現了兩種高表達的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估，結果顯示，12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達。Cazzoli等收集了30個血漿樣本，發現4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。離心除去細胞器，留取上清。

由于這些核酸被囊膜包裹而被保護，穩定性高，不易降解，是一種用于一些病癥診斷和預后監測的非常理想的新型生物標記物一些疾病的早期診斷、用藥監控、預后判斷。近年來，隨著人們對外泌體的研究和認識加深，外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創診斷、治病和監測；如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規化應用的關鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細胞液中快速提取的，其是活細胞分泌到胞外的囊泡樣小體，含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)，在體內細胞間物質和信號轉導中起到重要作用。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多。

外泌體的提取、分離方法：微流控技術。微流控是利用微納米級尺寸的管道來處理和操控流體所涉及的一門技術，其在外泌體分離方面的應用受到越來越多學者的關注。Jie等[16]課題組開發了一種三維納米結構微流控芯片，微柱陣列通過化學沉積將交叉多壁碳納米管功能化，然后其就可以識別特定的分子(CD63)并利用獨特拓撲納米材料高效的捕獲外泌體。Wunsch等[17]利用硅工藝生產納米級確定性側向位移(Nano-DLD)芯片，得到了均勻的間隙尺寸，該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離。該研究證明了外泌體基于大小的位移，從而揭示了利用芯片分選和量化納米級生物膠體的潛力。外泌體的提取方法：多聚物沉淀法。徐州正規外泌體提取試劑哪家好

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外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜，耗時，量少。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創診斷。徐州正規外泌體提取試劑哪家好