具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細胞碎片等亞細胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每10ml細胞培養液用30mlPBS重懸）清洗沉淀物，混勻，10,000×g70min6、lmlPBS溶解沉淀（外泌體），立即使用或置于-80℃備用。7、一般超速離心法會結合密度梯度離心，這樣得到的外泌體更純，具體做法第4步后蔗糖梯度離心，10,000×g70min，以去除密度大于1.21g/ml的顆粒。優點是：成本低，操作簡單，獲得的囊泡數較多。缺點是：耗時耗力（需用時8-30h，并且每次只能處理6個樣本），獲得的外泌體純度不是很高，高速及重復離心也會對外泌體產生很大的傷害，并且不適用于如血漿和血清等粘性液體生物樣本。外泌體提取：回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到質疑。太原外泌體提取試劑哪家好

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測，可以鑒定所提的外泌體。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量太原外泌體提取試劑哪家好磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點。

外泌體項目獲批學科方向：從統計來看，與前年相似外泌體立項集中的領域還是一些病癥學，近年來外泌體發表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成，耐藥性，檢測等方面有關。例如2019年發表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態平衡。發表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發現外泌體轉運p-STAT3可促進結直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關的miRNA作為子宮內膜ai分子標志物的可能性。此外，在神經系統和精神疾病，中醫學及其他領域也有不少外泌體相關項目中標。

外泌體與免疫系統：不同的細胞來源的外泌體，包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響，刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病：外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發生的發展過程中起作用。體外培養心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關的代謝適應有關；體外培養的間充質干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用。這些發現表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA，蛋白等物質改變受體細胞的代謝狀態。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創診斷外泌體提純試劑盒的特色與優勢：無需蛋白酶處理。

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養液或生物流體獲得外泌體，經過400×g、2000×g、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單，不需要復雜的技術支持，并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時、產率低，得到的外泌體的數量和質量很大程度上受轉子的類型、轉子沉降角度等因素影響，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體，但也會有其他的囊泡、蛋白質或蛋白和RNA的聚集體。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊。成都外泌體提取試劑平均價格

外泌體提取：可分離到大小相近的囊泡顆粒。太原外泌體提取試劑哪家好

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱，首先被流動相洗脫出來；小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強地滯留，更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。太原外泌體提取試劑哪家好