鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建，對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法：將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿（實驗組）和普通培養皿（對照組）中，并且均用0，10，100μmol/LH2O2誘導。24h后，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態，應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率，TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態，流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平，Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。珠海鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物質并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積，混勻，冰上備用。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6）使用時，無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。成都正規鼠尾膠原哪里買鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠。

一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調節pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀；2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調節PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理；(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預凍2?4小時，然后真空冷凍干燥，凍干產品經進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉，滅菌、包裝，得到成品膠原蛋白粉末。

鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色；礦化2d后，膠體的顏色逐漸加深至乳白色；礦化6d后，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內部，膠體顏色加深至純白色，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體，予鑷子夾起，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示：礦化2d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結構逐漸模糊，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內部，膠原纖維部分礦化，沿著膠原纖維生長，忖度變深；礦化6d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結構完全消失，膠原纖維內部可以看到黑色羥基磷灰石晶體，嵌入膠原纖維縱向生長。當鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據，膠原纖維呈現黑色，選區衍射斑圖符合羥基磷灰石表征。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速，所得產品的分子量是連續的，適用于醫用生物材料及原料的制備，但產品得率低，設備腐蝕嚴重，污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白，得到高純度的膠原蛋白溶液。一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴。深圳正規鼠尾膠原供應商

膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟部位外基質的主要成分。珠海鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織，數量有限，難以滿足臨床需要。因此，研發與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學者孜孜以求的目標。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產物，在分子結構上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長。本研究仿生天然骨組織的分子結構，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白，重構形成Ⅰ型膠原纖維，然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內骨生物礦化，通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內部的骨生物礦化。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。珠海鼠尾膠原直銷廠家