植物RNA提取過程:植物組織成分相對于動物組織來說復雜多樣,因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大,如果要完美的數據結果,那么提取純度高、完整性好的RNA就成了關鍵所在。植物RNA的提取一般會經歷以下幾個過程:1.破碎細胞壁。2.裂解細胞膜。3.雜質去除,包括:DNA、蛋白質、多糖、多酚、次生代謝產物等。4.純化和濃縮RNA。而在RNA提取過程中,純化除雜的過程是影響RNA純度的關鍵所在。在完整的細胞內,多糖多酚類化合物,次級代謝產物,蛋白質如RNase等與核酸是分離的,一旦細胞破碎,這些物質就不可避免的會與RNA發生相互作用。拭子RNA提取試劑的選擇?離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強。貴陽正規RNA提取試劑廠家直銷
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。二、試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩定性好,純度高和離心柱方便快捷的優點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。廈門正規RNA提取試劑服務電話RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。
總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。總RNA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。自備新開封或專門氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進行后續實驗,如反轉錄成cDNA,NorthernBlot等血漿/血清RNA提取試劑盒:普通植物總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質膜制作的總RNA吸附柱。
提取RNA的詳細步驟:首先,將研缽晾干夠,倒入1/3體積的液氮,加入0.2g均質的植物材料,充分研磨后轉入一個含有300微升GMT的1.5ml的離心管中,搖勻。然后,加入30微升2mol/lNaAc進行搖勻,加入300微升酸酚搖勻,加入100微升的氯仿搖勻。然后,在四攝氏度12000r/min下離心二十分鐘,吸取上清液的3/4,加入等體積的異丙醇,于冰上放置十五分鐘。然后,在四攝氏度12000r/min下離心十分鐘,將沉淀懸浮于含100微升的4mol/lLiCl小試管中,于-20攝氏度下放置過夜。然后,在4攝氏度13000r/min下離心10-15min,將沉淀溶于0.4mlDEPC處理水中,加入1/2體積氯仿和1/2體積酸酚,搖勻,進行抽提,在4攝氏度13000r/min下離心五分鐘。將上清液中加入等體積的氯仿搖勻,進行抽提,在四攝氏度13000r/min下離心五分鐘,上清液中加入1/10體積3mol/lNaAc和兩倍體積的午睡乙醇與-20攝氏度放置一小時。用于各種植物、動物、微生物的RNA提取,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。貴陽RNA提取試劑哪里買
細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:方便快捷的離心柱操作方式。貴陽正規RNA提取試劑廠家直銷
將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。貴陽正規RNA提取試劑廠家直銷
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...