鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿(實驗組)和普通培養皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態,流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時可形成具有一定強度三維膠。成都正規鼠尾膠原直銷價
鼠尾膠原蛋白等實驗技術應用:干細胞、血管內皮細胞等多種「難伺候」的細胞,以及一些組織在體外培養時,需要在模擬體內環境的細胞外基質中生長,膠原蛋白和纖粘蛋白正是細胞外基質的主要組成部分,富含1型膠原蛋白大鼠尾部也成了實驗室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的。它可以用于監測小鼠血液成分的變化,確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血,實驗用鼠尾尖取血的取血量較小,但取血之后,小鼠還能繼續下一步建模或者實驗,完全沒有性命之憂。貴陽鼠尾膠原生產廠家鼠尾膠原,是一種細胞支持物,它是細胞外基質的主要成份。
膠原蛋白的應用:1.膠原天然的緊密的纖維結構,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發現具有這品質;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團.所以與水結合的能力很強.這一性質使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質中膨脹,這一性質也應用于制備膠原基材料的處理工藝中。
鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構。鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質。
鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4)在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,混勻,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6)使用時,無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。珠海鼠尾膠原銷售廠家
加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。成都正規鼠尾膠原直銷價
服用膠原蛋白的注意事項:1、大分子膠原蛋白進入人體后需要降解為小分子肽、氨基酸才能被人體吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、這些食物多半脂肪含量較高,不適合經常食用。高熱量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易產生自由基,加速老化。如果能少吃這一類食物,就等于減少了身體被自由基傷害的機會及皮膚出現黑斑、皺紋等的風險。3、孕婦是不能服用膠原蛋白產品,因膠原蛋白是19種氨基酸組成的,其中有幾種是不能被胎兒吸收的,容易引起第二特征過早的發育和成熟,不利于出生后的嬰兒成長和發育。成都正規鼠尾膠原直銷價
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。B.含細胞的三維膠原的制備(以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10PBS10培養液,混勻(混勻后pH左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后,加入適...