鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法，采用酸法與酶法相結合的工藝。徐州鼠尾膠原廠家現貨

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取，但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質，也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型；同時，這種畜牧業大量飼養的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染，如果用此開發醫用產品更加存在著品質的不穩定及潛在的風險及危害；再次，人的真皮中主要含有I型和III型，但III型不易大量獲得，故應用單一的I型膠原蛋白是解決體外應用的醫用產品引起的抗原性問題的關鍵，這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一。同時，I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結構決定了它的一些特有的性能，如機械性能、促進細胞生長、弱抗原性、可生物降解性和膠原的自締合性。徐州鼠尾膠原廠家現貨成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。

膠原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解，水解條件溫和，反應速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構，蛋白純度高，理化性質穩定，且無環境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法，即利用酶液直接提取；二步法，即先用酸或者堿進行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預處理革屑，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白，探討了酶和酶的加入量對提取結果的影響，給出了酶對膠原提取較佳工藝配比，酶與牛腱的質量比為0.1時效果較佳，而使用無花果蛋白酶時，0.01的配比較佳。

鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對角膜上皮細胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對體外培養角膜上皮細胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質包被培養器皿,以普通培養器皿作對照,培養角膜上皮細胞,觀察細胞形態,進行細胞計數并描繪細胞生長曲線,比較不同基質對角膜上皮細胞的增殖作用。結果使用基質包被的培養器皿培養角膜上皮細胞,細胞增殖速度較普通組快,細胞形態、活力和長勢比普通組更佳,促進增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結論鼠尾膠原可促進角膜上皮細胞增殖,且增殖效果優于多聚賴氨酸和明膠。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。

膠原蛋白分離提純實驗方案：提取鼠尾膠原蛋白的實驗步驟：1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進行酶解，持續一段時間待混合物變成無色、透明、粘稠液體后即可在4℃，5000g的離心力下離心20min，收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中，持續攪拌直至白色絮狀沉淀從溶液中析出，繼續加入氯化銨直至沉淀不在析出為止，4℃，5000g的離心力下離心20min后獲得白色沉淀。沉淀物加入一定濃度的醋酸溶液中溶解。3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續反復進行鹽析處理，重復步驟2的過程2~4次。_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x000c_鼠尾膠原蛋白經SDS-PAGE蛋白質電泳。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高，折斷尾骨后拉出尾腱。唐山鼠尾膠原單價

利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。徐州鼠尾膠原廠家現貨

鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100ul10xPBS或10x培養液，混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。徐州鼠尾膠原廠家現貨