糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。糖類從組織化學技術角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。江西正規(guī)糖原染色試劑盒進貨價
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。3、應用隨著醫(yī)學實驗技術的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等~上海哪家提供糖原染色試劑盒推薦廠家擁有日本進口的各種染料,保證切片染色效果。
特殊染色化學試劑的選擇:化學試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量。1、一般要求選用很好品牌的化學試劑,特別是一些染色中關鍵的試劑。很好的化學試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關鍵,特別對于染液中的關鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質(zhì)量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時,所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,則會導致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純?yōu)橹鳌?/p>
糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應呈粗大的紫色顆?;驁F塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血?。涸剂<毎赎幮曰蛉蹶栃苑磻?,以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應~該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,對于細胞、極其薄的切片。湖南糖原染色試劑盒平均價格
過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以18~22℃佳。江西正規(guī)糖原染色試劑盒進貨價
注意事項:染色時:①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。在染色時,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。江西正規(guī)糖原染色試劑盒進貨價
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗的重要指標,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...