法爾和梅洛的發現。科學家在矮牽牛花實驗中所觀察到的奇怪現象，其實是因為生物體內某種特定基因“沉默”了。導致基因“沉默”的機制就是RNA干擾機制。此前，RNA分子只是被當作從DNA（脫氧核糖核酸）到蛋白質的“中間人”、將遺傳信息從“藍圖”傳到“工人”手中的“信使”。但法爾和梅洛的研究讓人們認識到，RNA作用不可小視，它可以使特定基因開啟、關閉、更活躍或更不活躍，從而影響生物的體型和發育等。諾貝爾獎評審會在評價法爾和梅洛的研究成果時說：“他們的發現能解釋許多令人困惑、相互矛盾的實驗觀察結果，并揭示了控制遺傳信息流動的自然機制。這開啟了一個新的研究領域。”與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構。上海正規RNA提取試劑廠家直銷

細胞RNA提取的方法：實驗提取步驟：標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分鐘，用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿，上下混勻液體，4度靜置10-15分鐘。（氯仿為有機溶劑，有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結合，從而使得蛋白和RNA脫離，RNA進入水相）。4度離心15分鐘，一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層，RNA在上清里，從離心機輕輕拿出EP管，以免管內物質震蕩導致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下層沉淀，將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇，4度靜置10min，然后12000rpm離心10min。上海正規RNA提取試劑廠家直銷RNA提取試劑注意事項：必須戴一次性手套操作。

細胞RNA提取的方法：異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側壁沉淀，輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀，幫助分離剩余的有機試劑（剩余有機試劑過多會影響OD值和PCR反應），輕彈沉淀，使其浮在酒精，靜置1-2min，讓酒精充分接觸沉淀，充分溶解有機試劑，然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機中瞬時離心，棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥，否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水，震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。

piRNA。是一類長度約為24-31nt的非編碼小RNA，通過特異性地與PIWI蛋白結合而發揮生物學作用。現已發現其在生殖干細胞分化、胚胎發育、維持基因組完整性、表達遺傳學調控、異染色質的形成和物種的性別決定等方面起著重要作用，此外在壓制轉座子轉錄和基因轉錄后調控中也扮演著重要角色，并且越來越多的研究表明在病癥組織中piRNA的表達不盡相同。lncRNA。長度約為200-100000個核苷酸，可以通過不同的分子生物學機制調控編碼基因的表達，參與疾病相關的信號通路，對疾病的發生、發展及醫治有重要作用。研究發現，lncRNA-DANCR明顯增強肝病細胞的感性特征，促進一些疾病細胞的形成，在體內干擾DANCR的作用可導致一些疾病細胞活力降低，同時阻止一些miRNA的壓制效應，揭發出一個涉及lncRNA、mRNA和miRNA的新一些疾病形成機制。可見，lncRNA對一些疾病方面有重要作用。另外有研究發現lncRNA在宿主抗病菌反應、骨關節炎、囊性纖維化、藥物研發等方面也有重要的臨床應用價值。排除其它核酸分子（DNA）的污染。

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、得率過低：提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底；應當使用適當質量的組織或細胞進行提取，樣本前處理一定要做好，裂解應充分。2、基因組殘留：Trizol法提取時，分層后吸取上清時吸到中間層會帶來嚴重的基因組污染；分層吸取時應當格外小心，不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取，可選擇含有DNaseI的試劑盒進行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進行消化，可極大限度的降低DNA殘留。再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質。上海正規RNA提取試劑廠家直銷

RNA提取試劑注意事項：使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。上海正規RNA提取試劑廠家直銷

動物細胞RNA提取：1、懸浮細胞：可直接離心后棄掉培養基，用無菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來，然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后，往沉淀細胞里直接加入裂解液，這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側，從而限制沉淀內部的細胞與裂解液的接觸，從而導致細胞裂解不徹底，降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞：棄掉培養基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養皿，把細胞吹下來，轉移到無RNA酶的EP管中，加裂解液進行提取。3、貼壁細胞：需要先用胰酶消化，然后收集到無RNA酶的EP管中，離心去其上清，用PBS洗1~2次，去除多余的胰酶，以適量PBS重懸后繼續進行提取步驟。上海正規RNA提取試劑廠家直銷