通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1、高純度:試劑盒的進口吸附柱具有的專一吸附特性和強吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產量和純度,前期得到的高質量RNA才能保證后續實驗成功,尤其是對熒光定量PCR實驗等。2、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會出現DNA污染其結果嚴重影響后續實驗,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實驗。一些市面上單獨賣的去DNA污染的試劑,效果不穩定,去除DNA污染不徹底。本產品操作簡單,去除DNA徹底,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉錄等各種后續實驗。血漿/血清RNA提取試劑盒:沒有DNA和蛋白質的污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析。蕪湖鄭州RNA提取試劑
經典Trizol法并不能獲得總RNA:這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實驗支持:經典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點,源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學家,專做RNA相關的研究,包括miRNA。幾年前她們組發現一個奇怪的“現象”,即貼壁細胞在消化之后,會有一些miRNA的豐度突然降低,看起來好像是被快速“降解”掉了,并據此寫了一篇文章發到MolecularCell上。但很快她們就發現,這個“現象”難以重復:如果用Trizol做實驗,就一定是陽性結果,而用試劑盒提RNA,就重復不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題?確實如此。經進一步實驗后發現,經典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失。杭州北京RNA提取試劑植物花總RNA提取試劑盒:可以從多糖多酚植物的根、莖、葉以及花組織中快速提取總RNA。
細胞外RNA(exRNA)已成為研究界的新寵。近年來,人們在血漿或血清樣本中成功檢測到疾病相關的exRNA,使其有望成為非侵入性的生物標志物。然而,從血漿或血清中分離exRNA仍頗具挑戰性,這一方面是因為exRNA豐度低,另一方面是因為血液中的污染物會壓制PCR。商品化的試劑盒能簡化和加速exRNA提取過程,已成為循環exRNA研究不可缺少的工具。然而,這些試劑盒的提取效率如何,是否能去除血漿中的污染物,是否會偏向特定的RNA,都沒有經過評估,而這類評估對于結果解釋和實驗之間的比較都很關鍵。
RNA充當遺傳物質:其實RNA并不是只能干這些臟活累活,實際上,它也是可以充當遺傳物質的。病菌的遺傳物質大多都是RNA,比如,這次的病菌的遺傳物質就是RNA。不過,如今具有細胞結構的生物,它們的遺傳物質基本上都是DNA。而科學家認為,其實較早的生物,其實都是以RNA作為遺傳物質的。這個假說也被叫做RNA世界假說。其實這個也很好理解,我們都知道RNA和DNA都有堿基,而且就是利用的堿基互補原則來完成任務的。DNA要完成生命活動就指導RNA。因此,只要RNA能夠完成類似于DNA的自我復制,那么就可以作為遺傳物質。RNA提取試劑注意事項:如皮膚接觸TRIReagent,請立即用大量去垢劑和水沖洗。
細胞RNA提取的方法:實驗提取步驟:標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養皿置于冰上,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘。(氯仿為有機溶劑,有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,RNA在上清里,從離心機輕輕拿出EP管,以免管內物質震蕩導致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔,切忌吸取太多,一般吸到400-500ul,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min。好的試劑盒價格比較貴,在實驗室可以根據自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。蕪湖鄭州RNA提取試劑
血漿/血清RNA提取試劑盒:對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結合能力。蕪湖鄭州RNA提取試劑
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,彼此用氫鍵相連,所以在甲醛變性膠中,沒有28S帶出現。RNA產量產率測定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進而計算出RNA的產量(濃度X體積)和產率(RNA產量/組織用量)。RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染,但一般不影響RT-PCR等反應。蕪湖鄭州RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...