Polysciences 是一家化學品制造公司,產品廣泛應用于各個科研領域。公司成立于1961年,起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學家揭示未知領域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應用產品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發染料和染色劑,以實現更好的樣品觀測方式。與government合作,開發了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家cancer中心合作,開發天然產物分離和純化產品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗。抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品,包括從Research grade到cGMP等級的無動物源培養基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(Advance Therapy Medicinal Products)藥物研發從R&D到Clinical trial以及后期商業化的無縫轉化;以及提供藥物開發和探索的抗體文庫定制和商業授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業化生產,以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術,分享研發工具進步帶來的技術紅利,終為細胞、基因產業以及再生醫學行業等乃至整個生命科學行業賦能!
更多關于PEI相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物! 哪個品牌的PEI轉染試劑比較好?聚乙烯亞胺PEI轉染試劑使用說明
細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中常規的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商,更多關于轉染試劑相關問題,歡迎咨詢上海曼博生物!血清兼容PEI轉染試劑使用注意事項用PEI轉染時,一般和DNA的比例會是多少呢?
瞬時轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
特別提醒1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優化。什么品牌的PEI轉染試劑比較好?
注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。近期還有PEIfree申請活動,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑的工作原理是什么呢?PolyplusPEI轉染試劑價格
PEI轉染試劑是否有毒性?聚乙烯亞胺PEI轉染試劑使用說明
Polysciences是一家化學品制造公司,產品廣泛應用于各個科研領域。公司成立于1961年,起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學家揭示未知領域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應用產品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發染料和染色劑,以實現更好的樣品觀測方式。與government合作,開發了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家cancer中心合作,開發天然產物分離和純化產品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發出超順磁珠,用于DNA、蛋白質和肽的研究。Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用,并不斷開發和增強其性能。近期業務擴展到電子產品,Polysciences的精密微粒子產品拓展了納米技術應用中測量精度。公司秉承為應用而研發,目前已擁有超過3000種產品。PolysciencesInc.致力于提供先進的技術、制造能力和技術支持,幫助客戶實現他們的目標。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商,更多關于轉染試劑相關問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
聚乙烯亞胺PEI轉染試劑使用說明上海曼博生物醫藥科技有限公司擁有生物醫藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術開發和應用除外)領域內的技術開發、自有技術轉讓,并提供相關的技術咨詢和技術服務;計算機軟件的開發、設計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產產品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產品(除危險化學品、監控化學品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學品)、儀器儀表、機械設備、電子設備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產品的批發、進出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】等多項業務,主營業務涵蓋血小板裂解液,WB自動孵育系統,微流控器官芯片,藍牙無線標簽機。公司目前擁有較多的高技術人才,以不斷增強企業重點競爭力,加快企業技術創新,實現穩健生產經營。上海曼博生物醫藥科技有限公司主營業務涵蓋血小板裂解液,WB自動孵育系統,微流控器官芯片,藍牙無線標簽機,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。一直以來公司堅持以客戶為中心、血小板裂解液,WB自動孵育系統,微流控器官芯片,藍牙無線標簽機市場為導向,重信譽,保質量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。
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