培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。培養基的配方也會受到環境、藥物和其他外部壓力的影響,因此,在實際應用中需要不斷進行調整和改進。YEPD培養基
培養基按成分分類有哪些?按形態分類:培養基按其不同的物理狀態,可分為液體、流體、半固體和固體4類,培養基的物理狀態取決于培養基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,常溫下以完全液態存在的培養基,如肉湯培養基或一般液體增菌培養基。2、流體培養基(semi-liquidmedium)在液體培養基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,使其具一定黏度,即成流體培養基。加入瓊脂粉增加了培養基的黏度,降低空氣中的氧氣進人培養基的速度,能使培養基保持較長時間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,如硫乙醇酸鹽培養基、改良馬丁培養基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養。索恩利氏培養基液體培養基、固體培養基和半固態培養基是常用的培養基種類。
長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑,避免培養基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養基pH會發生改變(一般使pH降低),可根據所培養微生物的要求,在培養基滅菌前后加以調整。
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。培養基也有不同的形態,可以是液體、半固體或固體形式。
還有一些鑒別性培養基,是利用細菌特有的各種酶系統,能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養基。用于細菌生化特性試驗的培養基特點是在無糖的基礎培養基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養基為生化反應鑒別培養基。根據用量又可分為常量生化培養基和微量生化培養基。值得注意的是生化試驗培養基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。培養基種類繁多,根據需求選擇適合的培養基對于成功的微生物培養至關重要。牛津瓊脂添加劑
常見的培養基包括LB培養基、TSB培養基等。YEPD培養基
什么培養基中可以省去加酚紅?酚紅在培養基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。YEPD培養基
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