氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養基:包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基,除含營養成分外,還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,如皰肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。MEB肉湯麥芽浸膏肉湯 查氏培養基/察氏瓊脂 霉菌瓊脂培養基 酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂(YGC/YDC)。有機磷細菌培養基
細胞培養過程中,細胞培養基是不可或缺的,細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養細胞生長和繁殖的生存環境。通常細胞體外培養時需要加入血清,以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細胞在培養過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細胞狀態。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細胞加入量會有差異,需根據細胞類型判斷。含糖牛肉湯培養基Bennett瓊脂放線菌肉湯 葡萄糖天冬酰胺液體培養基葡萄糖天門冬素液體培養基脯氨酸培養基高氏二號培養基。
培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。
在培養基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細菌生長,促進目的菌的繁殖,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養基稱為選擇性鑒別培養基。如SS瓊脂,在該培養基配方中含有乳糖(反應底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發酵乳糖產酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發酵乳糖,其菌落為無色。如細菌產生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的。羧甲基纖維素鈉(CMC)培養基 改良斯蒂芬遜培養基 HP培養基基礎 9K培養基 BG11瓊脂培養基。
L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細胞生長的必須氨基酸,可作為培養細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態不穩定,它的降解速率隨保存時間,保存溫度及保存環境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細胞培養中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩定性高,即可保持長時間穩定的營養供給,也降低了分解產物造成的細胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動物貼壁細胞或懸浮細胞培養添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導致細胞毒性,作為添加物培養條件更加可控,可有效提高細胞活力。PTYG培養基 改良巴爾斯氏培養基基礎不含硫酸亞鐵銨 BM液體培養基 BM固體培養基 PS培養基/消化球菌肉湯培養基。嗜鹽性試驗培養基基礎
Endo培養基遠藤瓊脂培養基 A1 培養基 MUG營養瓊脂培養基(NA-MUG)DEV乳糖蛋白胨肉湯麥康凱瓊脂(不含結晶紫)。有機磷細菌培養基
通常用心、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養基,并常需加入硫乙醇酸鈉、半胱氨酸、肉渣、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料。在液體培養基中還可加入刃天青或亞甲基藍作為氧化還原指示劑,以觀察培養基的含氧程度。心、腦浸液、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸,能吸收培養基中的氧。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強的還原劑,能消耗溶解在培養基中的氧。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養基中的氧。所以培養基中加入還原劑和吸收材料,目的都是為造成培養基的缺氧環境,使培養基保持較低的氧化還原電勢。此外,還可在培養基表面加一層液體石蠟,以隔絕培養基與大氣的接觸。有機磷細菌培養基
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