培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、色素和血清等)等。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。肉肝胃消化干粉培養基 多殺性巴氏桿菌培養基 克羅諾桿菌顯色培養基(CCI)。PS瓊脂
什么培養基中可以省去加酚紅?酚紅在培養基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。PS瓊脂ETSA培養基基礎 Stainer and Scholte液體培養基 RCVBN培養基 RCVBN瓊脂培養基。
HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡,以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中,溶液會變堿,Hanks′液在 CO2 培養箱中會變酸。如果希望在CO2培養箱中保存組織,需要用Eagle′s液,如果只是清洗將要在細胞培養基中儲存的組織,用Hanks′液就可以了。由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養用液時,需要注意一點:新配的培養基在經過 0.10um 或 0.22um 濾膜過濾時,溶液的pH 還會向上浮動0.2左右。
培養基按成分分類有哪些?按形態分類:培養基按其不同的物理狀態,可分為液體、流體、半固體和固體4類,培養基的物理狀態取決于培養基中是否加人凝固劑或凝固劑的加入量。1、液體培養基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固劑,常溫下以完全液態存在的培養基,如肉湯培養基或一般液體增菌培養基。2、流體培養基(semi-liquidmedium)在液體培養基中加入0.05%~0.1%的瓊脂粉,使其具一定黏度,即成流體培養基。加入瓊脂粉增加了培養基的黏度,降低空氣中的氧氣進人培養基的速度,能使培養基保持較長時間的厭氧條件,有利于一般厭氧菌的生長繁殖,如硫乙醇酸鹽培養基、改良馬丁培養基等。一般用于霉菌和厭氧菌檢查的液體培養基中可加人少量瓊脂使其成為流體培養。Endo培養基遠藤瓊脂培養基 A1 培養基 MUG營養瓊脂培養基(NA-MUG)DEV乳糖蛋白胨肉湯麥康凱瓊脂(不含結晶紫)。
培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。 堿性蛋白胨水(APW) 42℃生長試驗用培養基(弧菌用) 改良R2A瓊脂 BTB瓊脂。TYGPN培養基
0.9%氯化鈉 大腸桿菌噬菌體ΦX174液體培養基 乳糖發酵培養基/乳糖復發酵培養基 伊紅美藍瓊脂(不含乳糖)。PS瓊脂
按培養基的營養成分是否完全區分:1.基本培養基,亦稱“較低限度培養基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養基,稱為基本培養基,是含有營養要求較低成分的合成培養基,常用“[-]”表示。這種培養基往往缺少某些生長因子,所以經過誘變過的營養缺陷型菌株不能生長。2.完全培養基,基礎培養基添加血清等物質后,叫完全培養基,也叫(血清)細胞培養基。完全培養基可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,常以“[+]”表示。3.補充培養基,凡是只能滿足相應的營養缺陷型生長需要的組合培養基,稱為補充培養基,它是在基本培養基中加入該菌株不能合成的營養因子而組成的。根據在基本培養基中加入的是A或B等營養因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。PS瓊脂
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