SSM瓊脂是一種強選擇性培養基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他選擇性抑制劑和緩沖劑。這種培養基的設計旨在分離致病的沙門氏菌和志賀氏菌。以下是SSM瓊脂的一些關鍵特點和制備方法:1.**成分**:SSM瓊脂的基礎成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,這些提供碳源、氮源、維生素和礦物質。此外,還含有乳糖、三號膽鹽、枸櫞酸鈉、硫代硫酸鈉、枸櫞酸鐵銨、中性紅和煌綠等特殊成分,這些成分有助于抑制其他微生物的生長,同時促進目標菌的生長。2.**pH值**:SSM瓊脂的pH值通常控制在6.9-7.1之間,以保證微生物的生長環境。3.**制備方法**:首先,稱取培養基粉末,加入到適量的蒸餾水中,加熱煮沸并不斷攪拌直至完全溶解。然后,冷卻至50℃左右,傾入無菌平皿中備用。通常不需要高壓滅菌,因為培養基中的某些成分可能在高壓滅菌過程中失去活性。4.**應用**:SSM瓊脂主要用于沙門氏菌的分離培養,也適用于志賀氏菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌等腸道致病菌的分離培養。在這種培養基上,多數沙門氏菌不發酵乳糖,并產硫化氫,菌落表現為無色透明并有黑色中心。在VRBA培養基上,大腸桿菌菌落為帶有沉淀環的紫紅色或紅色,而其他非目標菌則可能呈現不同的顏色和形態 。Tinsdale瓊脂基礎添加劑
腸球菌肉湯(EnterococcusBroth)是一種專門用于增菌培養腸球菌的微生物培養基。它的特點和應用如下:1.**成分**:腸球菌肉湯的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛膽粉、氯化鈉、檸檬酸鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨和疊氮化鈉等。這些成分為腸球菌提供氮源、維生素和生長因子,同時維持適宜的滲透壓和提供選擇性抑制其他非目標菌種的環境。2.**選擇性**:牛膽粉和疊氮化鈉作為選擇性抑菌劑,有助于抑制非鏈球菌的細菌生長,特別是對革蘭氏陰性細菌有抑制作用。3.**應用**:該培養基主要用于食品和水中腸球菌的鑒別培養,如GB/T5750.12-2023生活飲用水標準中提到的應用。4.**制備方法**:通常將腸球菌肉湯的粉末配方溶解在蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進行高壓滅菌,以確保無菌。5.**質量控制**:在36±0.5℃培養24小時后,可以觀察到特定菌株的生長情況。例如,糞鏈球菌(CMCC(B)32223)在腸球菌肉湯中生長良好,呈現棕黑色,并具有棕色暈輪,而金黃色葡萄球菌(ATCC6538)和大腸埃希氏菌(ATCC25922)則被抑制,不生長或生長很差。Tinsdale瓊脂基礎添加劑VRBA培養基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、乳糖、氯化鈉、膽鹽、結晶紫和中性紅。
改良高氏二號培養基的pH值對放線菌生長有影響。放線菌通常偏好中性或微堿性的環境,一般適pH值在7.0到7.4之間。pH值的高低會直接影響放線菌的代謝活動、酶的活性以及細胞膜的穩定性。當pH值低于或高于這個范圍時,可能會抑制放線菌的生長,甚至導致細胞死亡。例如,在酸性條件下,細胞可能會失去能量產生效率,因為過多的質子會干擾細胞內的pH穩態和代謝途徑。而在過于堿性的條件下,放線菌的酶活性可能會受到抑制,影響其正常的生長和繁殖。在實驗室條件下,通常會在配制培養基后調節pH至放線菌的適生長范圍,并通過高壓滅菌確保培養基無菌。之后,在冷卻到適宜溫度時傾入無菌平皿中,用于放線菌的培養。如果培養基的pH值在滅菌過程中發生變化,可能需要在滅菌后進行重新調整。了解和控制pH值對于優化放線菌的培養條件至關重要,尤其是在進行大規模發酵或抗生物質生產等工業應用時。此外,不同的放線菌種類可能對pH值的偏好有所不同,因此在培養特定菌株時,可能需要調整pH值以適應其生長需求。
GC肉湯基礎是一種專門用于分離和培養苛養菌,特別是淋球菌和嗜血桿菌等的微生物培養基。其特點主要包括:1.**營養成分**:GC肉湯基礎含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鈉等成分,為微生物提供必需的營養。這些成分有助于維持微生物生長所需的能量和合成代謝物質。2.**pH值**:GC肉湯基礎的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長環境。3.**選擇性添加劑**:為了提高培養基的選擇性,可以添加抗生物質添加劑,如VCN添加劑(V.C.N.Supplement)、VCNT添加劑(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制劑(VCAInhibitor)、VCAT抑制劑(VCATInhibitor)、VancloT添加劑、LincoT添加劑等。4.**營養添加劑**:為了增加培養基的營養性質,可以加入維生素添加劑,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加劑(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要稱取一定量的GC肉湯基礎干粉,溶解在蒸餾水中,經過高壓滅菌后,冷卻至適當溫度,再加入過濾除菌的血紅蛋白溶液和GC添加劑,混勻后使用。6.**應用**:GC肉湯基礎用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無菌血紅蛋白粉各1支。SIM培養基中的硫酸鐵銨在細菌產生的硫化氫作用下生成黑色的硫化鐵沉淀。
堿性蛋白胨水(AlkalinePeptoneWater,簡稱APW)是一種常用的微生物培養基,主要用于嗜堿性細菌特別是弧菌的選擇性增菌培養。以下是APW的一些關鍵特點和應用:1.**成分**:APW的主要成分包括蛋白胨和氯化鈉。蛋白胨提供碳源和氮源,而氯化鈉維持均衡的滲透壓。2.**pH值**:APW的pH值通常控制在8.5±0.2(25℃),這種堿性環境有利于抑制非弧菌類細菌的生長,同時不影響副溶血性弧菌等嗜堿性細菌的生長。3.**制備方法**:稱取適量的APW培養基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中,加熱攪拌直至完全溶解,然后進行高壓滅菌。4.**應用**:APW用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養,也可直接用于弧菌的鏡檢。它用于食品、水和臨床樣本中的弧菌增菌培養。5.**質量控制**:使用特定的質控菌株進行生長測試,確保培養基的質量符合標準。例如,副溶血弧菌ATCC17802在該培養基中應表現出濃密生長。6.**儲存條件**:APW應在2-25℃的條件下避光保存,以保持其有效性。7.**注意事項**:在操作過程中應注意無菌操作,避免微生物污染。使用后的干粉培養基應立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊。LB瓊脂(Miller)是一種用于細菌培養的培養基,特別適合于大腸桿菌(E. coli)等革蘭氏陰性菌的培養。NLN基本培養基添加劑
LIM培養基主要用于腸道菌科細菌,如沙門氏菌和志賀氏菌的鑒定 。Tinsdale瓊脂基礎添加劑
改良卵磷脂肉湯(ModifiedLetheenBroth,MLB)是一種用于微生物檢測的培養基,它在抗菌洗手液細菌檢測中具有實用性。以下是改良卵磷脂肉湯的一些特點和制備方法:1.**成分**:改良卵磷脂肉湯的主要成分包括牛肉提取物、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、吐溫-80、卵磷脂、氯化鈉和亞硫酸鹽。這些成分提供了碳氮源、維生素和生長因子,同時卵磷脂和吐溫-80有助于中和防腐劑,并在乳濁液中分散物質。2.**pH值**:培養基的pH值通常控制在6.9~7.3之間。3.**制備方法**:-稱取42.8g的培養基粉末,加入1000mL的蒸餾水或去離子水中。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到試管中,進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**應用**:改良卵磷脂肉湯用于化妝品微生物檢測中的樣品稀釋和增菌。它能有效中和抑菌類產品中的抗(抑)菌活性物質,提高微生物檢出率。5.**質量控制**:使用特定的質控菌株進行生長測試,確保培養基的質量符合標準。例如,金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸埃希氏菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853在該培養基上應有良好的生長情況。Tinsdale瓊脂基礎添加劑